Table des Matières
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10.2
Préparation des échantillons
10.2.1 Préparation des échantillons pour les kits de prélèvement PapilloCheck
et PapilloCheck
Les frottis du col de l'utérus qui sont recueillis avec
•
le kit de prélèvement PapilloCheck
•
et le milieu de prélèvement PreservCyt
peuvent être traités directement.
Les frottis du col de l'utérus qui sont recueillis avec
•
le milieu de prélèvement Surepath
l'emploi : centrifuger 250 μl de l'échantillon pendant 5 minutes à 11 000 g et resuspendre le culot
dans 250 μl d'eau distillée.
Les frottis du col de l'utérus qui sont recueillis avec
•
le milieu de prélèvement STM
distillée : 100 μl d'échantillon + 150 μl d'eau distillée.
!
En général, si l'échantillon du frottis du col de l'utérus est très concentré et déjà agrégé, il doit être dilué et
homogénéisé avant le début de l'extraction !
Les échantillons de frottis du col de l'utérus qui sont très dilués et qui ne présentent pas de cellule visible
doivent être concentrés pour obtenir une plus forte concentration de cellules en vue de l'extraction.
Centrifuger jusqu'à 1000 μl d'échantillon pendant 5 minutes à 11 000 g et resuspendre le culot dans 250 μl
d'eau distillée.
Cette étape de concentration ne s'applique que pour les échantillons de frottis du col de l'utérus qui ont été
recueillis à l'aide du kit de collecte PapilloCheck
prélèvement Surepath
pas possible.
Pipeter 250 μl de solution échantillon dans un microtube d'1,5 ou 2 ml. Pour éviter toute
➠
contamination, utiliser des microtubes avec fermeture sécurisée ou fermeture à vis pour les
étapes de lyse.
Il est recommandé de valider toute la procédure d'isolation d'ADN de chaque cycle d'extraction
d'ADN à l'aide d'un contrôle négatif d'échantillon.
Kit d'extraction d'ADN oCheck
- Instructions d'utilisation
®
Révision 00 / Février 2011
high-risk
®
(Greiner Bio-One ; réf. 465 070)
®
(Hologic, Bedford, MA, États-Unis)
®
(BD, Franklin Lakes, NJ, États-Unis) doivent être lavés avant
TM
(Qiagen, Hilden, Allemagne) doivent être dilués dans de l'eau
TM
, du milieu de prélèvement PreservCyt
®
.
Si le milieu de collecte STM
TM
a été utilisé, une concentration par centrifugation n'est
TM
®
ou du milieu de
®
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