H Blocs de méthode dans ÄKTA oligopilot plus
Bloc de méthode
----- Block : Cou-
pling_Reag_Vol -----
0.00 Base Time
0.10 Coupling Time_0.5 {min}
0.30 End_block
----- Block : Coupling_push --
---
0.00 Base Volume
0.00 FlowThrough 0.50 {min}
2.00 Solvent_B ACN_Reag_4.1
12.00 LFlow_AB 0 {cm/h}
12.00 End_block
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Description
Le bloc Coupling requiert de l'ordinateur le calcul
des volumes corrects d'amidite et d'activateur à
ajouter, sur la base de l'échelle de synthèse et des
paramètres d'ADN. Cette instruction doit être sépa-
rée à un point d'arrêt unique, c.-à-d. un point unique
dans le temps (0,00, 0,10, 0,30).
Le débit utilisé conduit à un temps de contact de
0,50 min la première fois que les réactifs de cou-
plage traversent la colonne. Le temps de contact
est calculé à partir du volume de couplage restant
lorsque 1 équivalent est consommé.
Remarque :
Pour une efficacité maximale, le couplage total doit
être d'environ 1 CV.
Ce bloc achemine l'amidite et le tétrazole à travers
la colonne et la boucle de couplage à un débit
créant un temps de contact minimum de 0,5 min
pour les réactifs de couplage lorsque 1 équivalent
est consommé.
Le bloc commence à utiliser l'acétonitrile via la
•
pompe A et l'activateur via la pompe B.
Suite à l'ajout de 2 ml (1 ml pour chaque pompe),
•
la vanne 4 commute pour ajouter de l'acétoni-
trile via la pompe B. Le volume de poussée total
est de 12 ml avec un débit typique de 2,3 +
2,3 ml/min en utilisant PrimerSupport, 30 HL,
dans la colonne de 6,3 ml. La durée de cette
étape excède légèrement 2,5 min.
ÄKTA oligopilot plus Mode d'emploi 28959748 AE