Table des Matières
Publicité
6 14
Protocole d'encapsulation dans des membranes d'alginate-PLL-alginate
La membrane d'alginate-polylysine-alginate est un système d'encapsulation très bien établi pour les
cellules animales et décrit initialement par Lim et Sun
Solutions requises
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Éléments nécessaires pour une encapsulation de 12 mL de mélange polymère-produit :
1
Lim F. and Sun A.M. 1980. Microencapsulated Islets as Bioartificial Pancreas. Science 210 : p.908-910.
63
Solution d'alginate à 1,5 % :
Solution de polymérisation :
Solution PLL :
Tampon de lavage MOPS :
Solution d'alginate à 0,03 % : 2 mL de solution d'alginate à 1,5 %.
Solution de dépolymérisation : 50 mM de Na
•
12 mL Solution d'alginate à 1,5 % (filtration stérile)
•
100 mL Solution d'alginate à 0,03 % (non stérile)
•
225 mL Solution de polymérisation (non stérile)
•
75 mL Solution PLL (non stérile)
•
900 mL Tampon de lavage MOPS (non stérile)
•
200 mL Solution de dépolymérisation (non stérile)
. Ci-dessous un protocole éprouvé.
1
alginate à 1,5 % à faible viscosité dans un tampon de lavage MOPS
réglage du pH à 7,0 à 25 °C
filtration stérile dans un filtre de 0,2 µm
10 mM MOPS (acide morpholinopropanesulfonique)
100 mM CaCl
2
pH = 7,2 à 25 °C
15 000-30 000 mg de poly-L-lysine à 0,05 % dans un tampon de
lavage MOPS
10 mM MOPS (acide morpholinopropanesulfonique)
NaCl à 0,85 %
pH = 7,2 à 25 °C
+ 98 mL de tampon de lavage MOPS.
-Citrate
3
NaCl à 0,45 %
10 mM MOPS
pH = 7,2 à 25 °C
6 Fonctionnement
B-395 Pro Manuel d'utilisation, Version E
Publicité
Table des Matières
