Optimisation Des Méthodes; Exemple D'approche Recommandée Pour Le Développement De Méthodes - Waters ACQUITY Premier Manuel D'utilisation Et De Maintenance

La fonction de diagnostic Auto-Optimize Gain (Optimiser automatiquement le gain) génère un
chromatogramme d'essai et affiche les valeurs de gain idéales. Ces valeurs sont basées sur un
algorithme qui assure une marge d'un facteur 2 vis-à-vis de toute surcharge du tube
photomultiplicateur et de l'électronique associée en raison de variations de l'intensité de
fluorescence d'échantillons concentrés. Quand des événements de changement du gain et/ou de
la longueur d'onde sont planifiés, le rapport propose des valeurs ajustées correspondant au gain
idéal pour chaque région critique pour l'événement programmé. Intégrez les valeurs de gain
indiquées dans la méthode, notamment dans le tableau des événements programmés, pour
optimiser les performances de la méthode.
Le détecteur contrôle aussi le signal de fluorescence maximal pendant toute l'analyse. Lorsque
les sorties analogiques sont utilisées pendant l'acquisition de données, l'instrument affiche une
valeur EUFS (Unités d'énergie à pleine échelle) minimum valable pour le chromatogramme
entier. De même que le gain idéal, la valeur EUFS intègre une marge d'un facteur 2 permettant
de prendre en compte les variations éventuelles de l'intensité de fluorescence. Réglez, sur la
base de ce rapport, les valeurs du gain dans la méthode, notamment dans le tableau des
événements programmés, pour optimiser les performances de la méthode.
Le détecteur contrôle aussi le signal de fluorescence maximum pendant toute l'analyse. Il
recommande une valeur EUFS minimum, qui s'applique au chromatogramme entier et s'affiche
quand vous utilisez les sorties analogiques lors de l'acquisition de données. Cette valeur est
également calculée avec une marge de facteur 2 d'erreur.
3.9.1 Optimisation des méthodes
Vous pouvez télécharger une méthode contenant des modifications planifiées via des
événements programmés. Les modifications portant sur le gain, la longueur d'onde d'excitation
ou la longueur d'onde d'émission sont considérées comme étant des modifications essentielles
des conditions lumineuses. Elles concernent en effet des points auxquels la recherche du signal
maximal est de nouveau effectuée. Vous devez par conséquent placer les éventuels événements
programmés de changement du gain à des endroits stratégiques avant les pics, afin d'améliorer
la sensibilité du détecteur vis-à-vis de ces pics, le but étant de fournir un temps de rétention de
démarcation auquel un changement de gain est tolérable et ne gêne pas l'intégration des pics du
chromatogramme. Les conditions initiales doivent être optimisées avant d'exécuter la fonction de
diagnostic Auto-Optimize Gain (Optimiser automatiquement le gain). Aucun événement
programmé n'est nécessaire. Cela signifie, cependant, que le détecteur recommande un réglage
unique du gain pour tous les pics du chromatogramme et n'effectue pas une optimisation
séparée par région de pic.
3.9.2 Exemple d'approche recommandée pour le développement de
méthodes
Utilisez une méthode comportant deux changements par événements programmés pour
optimiser le chromatogramme ci-dessous.
10 novembre 2021, 715006949FR Version 01
Page 29