illumina iSeq 100 Manuel Système page 32

Guide du système de séquençage iSeq 100
5 Préparez le volume approprié de librairie 1 nM dans un microtube à faible adhérence en utilisant la
solution RSB comme diluant :
Type de librairie
Contrôle PhiX à 100 % (analyses comprenant
uniquement le contrôle PhiX)
Librairie PLUS Ampliseq pour Illumina
ADN Flex Nextera
Flex Nextera pour l'enrichissement
ADN Nano TruSeq
ADN sans PCR TruSeq
Pour que le séquençage soit réussi, il est essentiel de diluer les librairies dans des microtubes à faible
adhérence.
6 Agitez brièvement, puis centrifugez à 280 × g pendant une minute.
7 [Facultatif] Conservez la librairie 1 nM entre -25 °C et -15 °C pendant un maximum de un mois.
Diluer la librairie 1 nM pour obtenir la concentration de chargement
1 Combinez les volumes suivants dans un microtube à faible adhérence pour préparer 100 µl de librairie
diluée à la bonne concentration de chargement :
Type de librairie*
Contrôle PhiX à 100 %
Librairie PLUS Ampliseq pour
Illumina
ADN Flex Nextera
Flex Nextera pour
l'enrichissement
ADN Nano TruSeq
ADN sans PCR TruSeq
* Pour les librairies absentes de la liste, y compris les autres librairies Nextera, commencez avec une concentration de chargement de 50 pM et
optimisez la concentration au fil des analyses.
Ce tableau fournit des exemples de concentrations de chargement. Le système iSeq 100 est compatible
avec toutes les trousses de préparation de librairies d'Illumina, sauf la trousse SureCell WTA 3' , mais la
concentration optimale de chargement peut varier.
2 Agitez brièvement, puis centrifugez à 280 × g pendant une minute.
3 Déposez la librairie diluée sur de la glace en vue du séquençage.
Séquencez les librairies diluées à la concentration de chargement le jour même de leur dilution.
4 Si vous n'ajoutez pas de contrôle PhiX ou si vous effectuez une analyse comprenant uniquement le
contrôle PhiX, ignorez la section suivante et rendez-vous à la section
cartouche, page 25.
Document nº 1000000036024 v05 FRA
Destiné à la recherche uniquement. Ne pas utiliser à des fins de diagnostic.
Volume de librairie 1 nM à
Concentration de
chargement (pM)
60
50
200
100
100
100
préparer (µl)
8
7
25
12
12
12
Volume de la
librairie 1 nM (µl) solution RSB (µl)
6
5
20
10
10
10
Charger les consommables dans la
Volume de la
94
95
80
90
90
90
24