Table des Matières
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6. Résoudre un gel de superposition
(0,375 M TrisCl, 0,1% SDS, pH 8,8, 100 ml)
1,5 M Tris-Cl, pH 8,8 (Solution #2)
10% SDS (Solution #4)
Désionisée H
O
2
Stockez jusqu'à 3 mois à 4 °C dans l'obscurité.
-ou-
De l'eau saturée en n-butanol
Agiter le n-butanol et désionisée H
ampoule à décanter. Retirez le aqueuse (inférieure) de
phase. Répétez cette procédure plusieurs fois. Utilisez
la phase supérieure.
-ou-
Si un recouvrement interfère avec le protocole préféré,
isoler le gel de l'oxygène atmosphérique en plaçant un
peigne préparative ou gel de résolution sur le gel ex.
7. 2X tampon traitement de l'échantillon
(0,125 M TrisCl, 4% SDS, 20% glycérol,
0,2 mM DTT*, pH 6,8, 10 ml)
0,5 M Tris Cl, pH 6,8 (Solution #3)
10% SDS, 0,35 M (Solution #4)
Glycérol (FW 92,09)
Dithiothreitol (DTT) (FW 154,2)
Bleu de bromophénol (FW 691,9)
Désionisée H
O
2
ou 2-mercaptoethanol (FW 78,13)
*
Diviser en parties aliquotes 1,0 ml et conserver à -40 °C à
-80 °C pour un maximum de 6 mois.
-ou-
6X tampon traitement de l'échantillon
(0,35 M TrisCl, 10% SDS, 30% glycérol, 9,3% DTT,
pH 6,8, ~10 ml)
0,5 M TrisCl, pH 6,8 (Solution #3)
SDS (FW 288,4)
Glycérol (FW 92,09)
DTT (FW 154,2)
Bleu de bromophénol (FW 691,9)
Diviser en parties aliquotes 1,0 ml et conserver à -70 °C.
0,375 M 25,0 ml
3,5 mm
1,0 ml
à 100,0 ml
O dans une
2
0,125 M
2,5 ml
0,14 M
4,0 ml
20% v/v
2,0 ml
0,2 mM
0,31 g
0,3 mM
2,0 mg
à 10,0 ml
2% v/v
0,2 ml
0,35 M
7,0 ml
0,35 M
1,0 g
30% v/v
3,0 ml
0,6 M
0,93 g
0,175 mm
1,2 mg
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