Table des Matières
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problème
cause possible
Résolution bande
Conditions de
pauvre
fonctionnement
Qualité réactif
Pauvre empilage
Polymérisation en
gel incomplète
La préparation des
échantillons
remède
Commencer l'électrophorèse dès que l'échantillon est chargé
d'empêcher espèces de faible poids moléculaire à partir de
diffusion.
Effectuer la séparation en basse tension ou de courant pour
réduire le chauffage par effet Joule.
Utilisez uniquement les réactifs la plus haute qualité.
Utilisez des gels seulement qui ont été récemment préparés.
Ajouter un gel d'empilement ou augmenter la taille du
gel d'empilement. Préparer la surface résolvant-gel en
commençant par le rinçant avec empilage-gel monomère
avant de verser le gel d'empilement pour assurer la
continuité entre les gels.
Vérifier les valeurs de pH des résolution-et-gel d'empilement
des solutions. Ne reculez pas-titrage tampons.
Permettre à un gel pour polymériser complètement.
Conserver l'échantillon sur la glace avant qu'il ne soit
dénaturé.
Dialyser ou dessaler l'échantillon.
Échantillons de chaleur dans le tampon d'échantillon SDS
pour pas plus de 1–2 min à 100 °C pour améliorer la
dissociation des sous-unités. Conservez-le sur la glace après
le chauffage.
Ajustez le volume d'échantillon ou de la concentration.
Ajouter plus de mercaptoéthanol ou le dithiothréitol; vérifier
traitement de l'échantillon.
Ajouter inhibiteurs de la protéase tels que PMSF si
nécessaire pour prévenir la dégradation protéolytique de
l'échantillon.
Augmenter le glycérol ou le saccharose pour augmenter la
densité de l'échantillon.
Conserver les échantillons à congeler en portions aliquotes
pour éviter répétée congélation-décongélation. Conserver à
-40 à -80 °C.
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