Table des Matières
Publicité
problème
cause possible
Stries protéines
Les particules
verticalement
présentes dans
l'échantillon
Surcharge
Dégradation
Anormalement lent
Courant de fuite
(ou rapide) run
autour de gel
Echantillon ou la
préparation des
réactifs
Qualité réactif
Réglages de tension
ou de courant
Les bandes
Préparation de gel
sont biaisées
et de polymérisation
ou déformées
incomplète
Interface irrégulière
entre l'empilement
et en cours
d'exécution gels
La préparation des
échantillons
remède
Centrifuger ou filtrer l'échantillon avant le chargement pour
éliminer les particules.
Chargez moins de l'échantillon.
Ajouter l'inhibiteur de protéase tels que PMSF.
Vérifier les fuites; toutes les plaques et les entretoises
doivent être alignées et exempt de graisse et les fissures.
Si elle est utilisée, le barrage tampon doit être sécurisé.
Si le pH nécessaire d'une solution est dépassée, ne pas
reculer-titrer. Jeter et de préparer un tampon frais.
Vérifiez recettes, les concentrations de gel, et de la dilution
du tampon. (Par exemple, ne pas utiliser de Tris-HCl au lieu
de Tris pour réservoir tampon Laemmli.)
Diminuer la concentration en sel d'échantillons.
Éliminer des solutions d'acrylamide plus âgés et à utiliser
seul stock de la plus haute qualité. Utilisez uniquement
l'urée fraîchement désionisée.
Pour augmenter ou diminuer le taux de migration,
d'ajuster l'. Tension ou de courant de 25-50%
Degas l'empilement-gel solution et éviter de piéger des
bulles d'air sous les dents du peigne.
Superposez le gel avec de l'eau en cours d'exécution-butanol
saturé avant polymérisation commence, pour éviter la
formation d'une surface du gel inégale.
Dialyser ou dessaler l'échantillon.
•
p29
Publicité
Table des Matières
