B.2.4.3 Absorbance de la phase mobile
Cette section répertorie les absorbances, à différentes longueurs d'onde, des phases mobiles les plus utilisées. Choisissez
soigneusement la phase mobile, de manière à ce que le bruit de la ligne de base soit le plus bas possible.
La phase mobile idéale est celle qui est transparente aux longueurs d'onde de détection sélectionnées. Avec une telle phase mobile,
assurez-vous que toute absorbance est due uniquement à l'échantillon. L'absorbance par la phase mobile réduit également la plage
dynamique linéaire du détecteur d'une valeur équivalente à la quantité d'absorbance annulée par la fonction de mise à zéro. La longueur
d'onde, le pH et la concentration de la phase mobile affectent également son absorbance. Des exemples de phases mobiles sont
proposés dans le tableau suivant, où les absorbances sont calculées d'après une longueur de tubulure de 10 mm.
Tableau B–5 : Mesure de l'absorbance d'une phase mobile par rapport à l'air ou à l'eau
Phase mobile
Solvants
Acétonitrile
Méthanol (non dégazé)
Méthanol (dégazé)
Isopropanol
Tétrahydrofurane non stabilisé (THF, frais)
Tétrahydrofurane non stabilisé (THF, ancien)
Acides et bases
Acide acétique, 1 %
Acide chlorhydrique, 0,1 %
Acide phosphorique, 0,1 %
Acide trifluoroacétique
Phosphate de diammonium, 50 mM
Absorbance, en AU, à une longueur d'onde donnée, en nm
200
205
210
0,05
0,03
0,02
2,06
1,00
0,53
1,91
0,76
0,35
1,80
0,68
0,34
2,44
2,57
2,31
> 2,5
> 2,5
> 2,5
2,61
2,63
2,61
0,11
0,02
< 0,01 —
< 0,01 —
—
1,20
0,78
0,54
1,85
0,67
0,15
7 juin 2021, 715007449FR Version 00
Page 84
215
220
230
240
0,01
0,01
< 0,01 —
0,37
0,24
0,11
0,05
0,21
0,15
0,06
0,02
0,24
0,19
0,08
0,04
1,80
1,54
0,94
0,42
> 2,5
> 2,5
> 2,5
> 2,5
2,43
2,17
0,87
0,14
—
—
—
—
—
—
—
0,34
0,22
0,06
< 0,02 < 0,01 —
0,02
< 0,01 —
—
250
260
280
—
—
—
0,02
< 0,01 —
< 0,01 —
—
0,03
0,02
0,02
0,21
0,09
0,05
> 2,5
2,5
1,45
0,01
< 0,01 —
—
—
—
—
—
—
—
—
—
—