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5.1
Préparations générales
Introduction
Les gels d'agarose sont d'abord coulés à l'aide du kit de coulage de gel ; les échantillons
sont ensuite chargés dans les puits et séparés par électrophorèse. Il est possible
d'ajouter du bromure d'éthidium fluorescent dans le gel, dans le tampon d'électropho-
rèse ou dans les deux, pour suivre la progression de la séparation. Une fois l'électropho-
rèse accomplie, le gel peut être coloré et photographié, transféré ou séché en vue
d'une autoradiographie.
Préparations initiales
S'assurer que tous les composants ont été lavés avec une solution diluée de détergent
de laboratoire et rincés avec soin.
Veiller également à mettre l'unité de niveau en plaçant le niveau à bulle sur la plate-
forme d'analyse et en ajustant les pieds de nivellement.
Préparation des solutions
Préparer les solutions comme suit.
Étape
1
2
3
4
Max Submarine Unit Operating Instructions 29281920 AB
Action
Préparer 1,3 l de tampon d'analyse. Jusqu'à 100 ml de tampon sont néces-
saires pour le gel et 1,2 l pour la chambre de tampon.
Préparer le tampon pour le chargement de l'échantillon.
Préparer une ou plusieurs solutions d'agarose selon les instructions du fabri-
cant, en utilisant le tampon d'analyse comme solvant. Laisser la solution
refroidir à 50 °C avant de la verser sur le plateau d'analyse.
Facultatif : Ajouter 0,5 μg/ml de bromure d'éthidium à la solution de gel
pour pouvoir observer la progression de la séparation pendant l'électropho-
rèse.
AVERTISSEMENT
Le bromure d'éthidium est un mutagène connu. Toujours
porter des gants pour le manipuler.
5 Fonctionnement
5.1 Préparations générales
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