Table des Matières
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2. Laissez les boîtes avec les couvercles dans l'environnement aseptique pendant 12
heures pour dégazage.
3. Chauffez les boîtes sur une surface chaude ou un incubateur avant de les remplir.
4. Remplissez tous les puits avec l'application. 25 µl de milieu de culture équilibré
pré-cultivé dans un environnement aseptique. Le remplissage des puits de lavage
est facultatif. Ils peuvent contenir environ 23 µl chacun.
5. Vérifiez au microscope si des bulles d'air sont visibles et retirez-les à l'aide d'une
pointe.
6. Remplissez la zone pour l'huile avec une couche confluente d'huile minérale ou de
paraffine appropriée pour couvrir le milieu de culture. Ne remplissez pas excessi-
vement.
7. Placez le couvercle sur la boîte et attendez 4 heures pour que l'équilibrage dans
l'incubateur à CO
8. Vérifiez l'absence de bulles d'air dans les puits de culture après l'équilibrage. Éli-
minez les bulles éventuelles à l'aide d'une pointe.
9. Placez les embryons dans les puits. Assurez-vous que les embryons sont situés
très précisément au centre du puits de culture et non sur la pente latérale.
10. Remplissez éventuellement le réservoir pH et insérez le bouchon en silicone.
11. Incubez CultureCoin
10 Illustration
Chacun des 14 puits est rempli d'environ 25 µl de milieu de culture. Les puits de lavage
peuvent également être remplis mais il ne s'agit pas d'une obligation. L'embryon est placé
au fond de la zone de culture.
se fasse.
2
dans le MIRI
TL.
®
®
Figure 10.1 Les puits
CultureCoin
Manuel de l'utilisateur Rév. 4.0
®
11
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