Manuels Connexes pour Mettler Toledo MR-10
Sommaire des Matières pour Mettler Toledo MR-10
- Page 1 RAININ Pipetage 360° Pipettes Cônes Techniques Évaluation Choix Techniques Obtenez de meilleurs résultats Découvrez les lois des sciences en direct, et apprenez en toute facilité Guide de référence pour le pipetage...
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Page 2: Table Des Matières
Table des matières 1. Avant-propos 2. Planification, flux de travail et sélection Planification du projet et flux de travail Analyse du flux de travail Optimisation du flux de travail Plage de volumes et type d'échantillons Exigences en matière de format de contenant des échantillons/réactifs Exigences spécifiques à... - Page 3 Table des matières 5. Techniques de pipetage Plage de volumes optimale Profondeur d'immersion du cône Aspiration à l'angle approprié Maintenance de la cohérence Distribution homogène de l’échantillon Pré-rinçage des cônes Éviter les variations thermiques Cohérence des paramètres du micromètre Quel est le risque lié au pipetage ?
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Page 5: Avant-Propos
1. Avant-propos Le programme Good Pipetting Practice vise à aider les chercheurs à choisir leur équipement en connaissance de cause. Il explique les techniques de pipetage et ergonomiques appropriées, l'étalonnage et le contrôle en routine, afin d'obtenir les meilleurs résultats possibles. Pipeter (ou mesurer et transférer) de petits volumes de liquide de l'ordre du microlitre ou du millilitre est probablement l'une des tâches les plus fréquentes dans les laboratoires de recherche. -
Page 6: Planification, Flux De Travail Et Sélection
2. Planification, flux de travail et sélection Planification du projet et flux de travail La plupart des nouveaux projets peuvent être optimisés via un processus de planification complet, où toutes les étapes sont analysées pour une efficacité et une génération de données maximum. Du point de vue de la manipulation de liquides, cela implique de connaître le type d'échantillon initial, l'analyse de point final et les cadences d'analyse. - Page 7 Analyse du flux de travail • Identification de la tolérance maximum pour la variabilité expérimentale • Identification des applications et des étapes les plus propices à la variabilité - qPCR - dilutions en série...
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Page 8: Optimisation Du Flux De Travail
Optimisation du flux de travail Plage de volumes et type d'échantillons Généralement, un flux de travail suppose de commencer par des volumes re- lativement importants de quelques liquides (par ex., préparation de tampons, mise en plaque de cellules, etc.) où il peut être courant de transférer 5 ou 10 mL sans mettre l'accent sur l'exactitude. - Page 9 Capacité Exac- Fidélité Exac- Fidélité Exac- Fidélité pipette min. max. titude 10 % titude 50 % titude 100 % 10 % 50 % 100 % MR-10 0,5 µL 10 µL 3 % 2 % 0,60 % 1,50% 0,60 % Pipettes à déplace- MR-250 50 µL 250 µL 3 % 0,60 % 1,70 % 0,30 % 1 % 0,20 % ment positif MR-1000 100 µL...
- Page 10 Certains types de pipettes conviennent mieux que d'autres à certains types d'échantillons. Par exemple, les échantillons visqueux requièrent une tech- nique ou un modèle de pipette différent afin d'obtenir une fidélité et une exac- titude optimales. Le tableau ci-après fournit des informations plus détaillées : Type de solution échantillon Plage de Solution suggérée...
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Page 11: Exigences En Matière De Format De Contenant Des Échantillons/Réactifs
Exigences en matière de format de contenant des échantillons/réactifs L'utilisation de plaques 96 puits peut nécessiter le déplacement de plusieurs échantillons ou réactifs de tubes vers les plaques, ou inversement ; des trans- ferts sont parfois également nécessaires entre différents formats de plaques (de 24 à... -
Page 12: Exigences Spécifiques À L'échantillon/L'analyse
Exigences spécifiques à l'échantillon/l'analyse Les pipettes électroniques peuvent s'avérer avantageuses lorsque le pipetage est complexe ou répétitif, car vous pouvez les utiliser pour répéter le pipetage et les programmer pour des protocoles de pipetage spécifiques. En outre, les données obtenues sont plus cohérentes qu'avec les pipettes manuelles, car le microprocesseur élimine l'erreur humaine, ainsi que la variabilité... - Page 13 Une fois les plages de volumes et les types de pipette choisis, la prochaine étape consiste à identifier les cônes adaptés à toutes les applications impliquées. Les cônes sont généralement en polypropylène ; bien qu'ils soient inertes et capables de résister à de nombreux solvants, il est nécessaire de tenir compte de facteurs intrinsèques au polypropylène.
- Page 14 Filtre Bloque les aérosols Aérosols La considération suivante en matière de cônes est la disponibilité des volumes spécifiques requis pour les différentes pipettes choisies, ainsi que les éventuels cônes spécialisés requis pour l'application, par ex. les cônes à filtre pour les applications génomiques.
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Page 16: Choix De La Pipette La Plus Adaptée
3. Choix de la pipette la plus adaptée De nombreux outils de pipetage sont disponibles afin d'obtenir des résultats optimaux et une meilleure productivité, tout en offrant des avantages supplé- mentaires, tels qu'une ergonomie améliorée et une meilleure fonctionnalité pour une application donnée. Il existe deux principaux types de micropipettes : à... -
Page 17: Pipettes À Déplacement D'air
Pipettes à déplacement d'air • Exactitude exceptionnelle avec les solutions aqueuses • Économiques Les pipettes à déplacement d'air sont les instruments de pipetage en laboratoire les plus courants. On les utilise en plaçant l'extrémité du cône dans l'échan- tillon liquide, puis en relâchant le bouton-poussoir. Un vide partiel se crée lorsque le piston remonte dans le corps de la pipette, et l'échantillon remonte dans le cône pour remplir ce vide, équivalent au volume sélectionné. -
Page 18: Optimisation Du Flux De Travail
Optimisation du flux de travail Exigences en matière de plage de volumes et de type d'échantillons piston se déplace Généralement, un flux de travail suppose de com- vers le haut mencer par des volumes relativement importants de quelques liquides (par ex., préparation de tam- pons, mise en plaque de cellules, etc.) où... - Page 19 et fidélité doivent être définies, car les différents Verrouillage du volume outils pour les volumes importants ont des capaci- Réglage du volume / tés différentes. Pour le choix du volume de pipette Bouton-poussoir Crochet ergonomique adapté, il est recommandé d'estimer la plage Bouton de d'utilisation entre 35 et 100 % du volume total in- l'éjecteur de cônes...
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Page 20: Pipettes Électroniques Monocanal
Pipettes électroniques monocanal Les pipettes électroniques sont sur le marché de- puis le milieu des années 1980. Dans les pipettes électroniques à déplacement d'air, l'aspiration et la distribution sont contrôlées par un microprocesseur et initiées par un déclencheur, plutôt que d'appuyer manuellement sur un bouton-poussoir. -
Page 21: Pipettes Multicanaux
Pipettes multicanaux Les pipettes multicanaux sont idéales pour les applications à haut rendement, notamment les tests ELISA sur plaque 96 puits et la PCR pour la synthèse d'ADN. Les pipettes multicanaux au design avancé, telles que les modèles lé- gers 8 et 12 canaux Rainin, offrent une conception ergonomique et chargent les cônes rapidement et en toute sécurité... -
Page 22: Systèmes De Pipetage Haut Rendement
Systèmes de pipetage haut rendement Les systèmes de pipetage pouvant aspirer et distribuer les échantillons dans 96 puits à la fois conviennent parfaitement aux flux de travail sur plaque rapides et efficaces. Jusque récemment, le pipetage sur 96 puits ou sur des plaques entières était uniquement possible avec des systèmes robotisés coûteux. -
Page 23: Pipettes Spécialisées
Pipettes spécialisées D'autres types de pipettes (ou de dispositifs de manipulation de liquides), moins courants que les pipettes à déplacement d'air, sont souvent préférés par les chercheurs pour leur conception et leur ap- plication spécifique. Pipettes à déplacement positif Rainin Pos-D est un exemple de pipette manuelle à... -
Page 24: Pipettes À Distribution Répétée
Pipettes à distribution répétée Grâce à leur seringue et à leur piston intégré, les pipettes à distribution répétée fonctionnent sur le principe du déplacement positif. Elles sont conçues pour prélever un volume important d'échantillon et le distribuer en plusieurs aliquotes égales. Elles sont disponibles en versions électronique et ma- nuelle, et utilisent des seringues jetables dans une large gamme de volumes. -
Page 25: Dispositifs D'aide Au Pipetage
Dispositifs d'aide au pipetage Principalement utilisés pour les volumes impor- tants (25-100 µL), il s'agit de dispositifs électro- niques ou manuels fournissant l'aspiration pour les pipettes sérologiques en verre ou en plastique. La pipette est fixée à un « nez » souple et l'utilisateur appuie sur un bouton du dispositif d'aide au pipe- tage pour créer un vide partiel à... -
Page 26: Distributeurs Pour Flacons
Distributeurs pour flacons Par nature, certains liquides en laboratoire (par ex. les liquides corrosifs ou toxiques) doivent rester à leur place sous une hotte ou une cabine de sécurité. Un distributeur pour flacons permet de transférer en toute sécurité des quantités relativement faibles de ces liquides. -
Page 28: Choix Du Cône Le Plus Adapté : Conception, Qualité Et Adéquation
4. Choix du cône le plus adapté : conception, qualité et adéquation Il convient de considérer la pipette et le cône recommandé par son fabricant comme un système global plutôt que comme deux composants individuels. Les cônes de pipette présentés comme universels font souvent des compromis en matière d'adéquation ou de conception, car ils sont conçus pour s'adapter à... -
Page 29: Qualité Des Cônes
Qualité des cônes Les défauts de qualité les plus graves surviennent au niveau de l'orifice ou de l'ouverture, là où l'impact sur l'aspiration et la distribution est le plus impor- tant. La figure 13 présente une vue grossie de 4 extrémités de cônes. La bavure est un résidu de plastique provenant du moulage, à... -
Page 30: Étanchéité Des Cônes De Pipette
Étanchéité des cônes de pipette La plupart des cônes sont conçus pour s'adapter à toutes les marques de pi- pettes : le joint entre l'intérieur du cône et l'extérieur de l'embout de la pipette est large, afin de convenir à la plus grande variété de pipettes. Ce joint relati- vement large crée davantage de friction entre l'embout et le joint à... - Page 31 Universel Système LTS Lite Touch Zone d'étanchéité réduite Grande zone d'étanchéité Butée positive Figure 14 : Systèmes de cônes universels (coniques) et LTS (cylindriques)
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Page 32: Choix Des Cônes
Choix des cônes En bref, pour garantir un débit constant et égal de l'échantillon et réduire le risque de contamination, il convient de tenir compte des points suivants pour choisir les cônes de pipette : Matériau du cône. Les cônes doivent être fabriqués en matériau à très faible rétention, comme le polypropylène vierge, et sans additifs, colorants ou maté- riaux recyclés. - Page 33 Les cônes allongés sont plus étroits et plus longs que les autres cônes d'un volume équivalent. Leur faible diamètre et leur longueur de 102 mm permettent à ces cônes d'atteindre le fond de tubes étroits et de puits profonds, sans que la pipette ou l'éjecteur de cônes ne touche la paroi du récipient.
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Page 34: Techniques De Pipetage
5. Techniques de pipetage L'évaluation correcte de votre application et la sélection de vos instruments en conséquence ont un impact considérable sur les résultats de vos recherches. Toutefois, ces facteurs ne suffisent pas pour obtenir des résultats optimaux. D'autres influences, telles que la technique de pipetage appropriée, les in- fluences de l'instrument et de l'environnement, ont un impact notable sur les résultats. -
Page 35: Plage De Volumes Optimale
Plage de volumes optimale Pour la plupart des pipettes, la plage de fonctionnement se situe entre 10 et 100 % du volume nominal. Cependant, les spécifications de performances changent à mesure que le paramètre de volume diminue. Les spécifications d'exactitude pour une pipette de 100 µL sont de +/- 0,8 % de 50 à... -
Page 36: Profondeur D'immersion Du Cône
Profondeur d'immersion du cône La profondeur d'immersion appropriée du cône permet jusqu'à 5 % d'amélio- ration de la précision, et s'avère particulièrement importante pour les pipettes micro-volume. Le cône doit être immergé entre 1 et 2 mm pour les pipettes mi- cro-volume et entre 6 et 10 mm pour les pipettes à... -
Page 37: Aspiration À L'angle Approprié
Aspiration à l'angle approprié L'angle d'immersion du cône de votre pipette dans l'échantillon doit être aussi proche que possible de 90 degrés et ne doit pas s'écarter de plus de 20 degrés de la verticale. En ce qui concerne les micropipettes, conserver un angle le plus proche possible de la verticale peut apporter jusqu'à... - Page 38 Maintien de la cohérence La constance du rythme et de la vitesse de pipetage vous permet d'obtenir des résultats optimum de manière plus répétitive. Un rythme et une vitesse constants vous permettent d'améliorer l'exactitude jusqu'à 5 %. Rythme de pipetage régulier Maintenez un rythme constant de pipetage d'un échantillon à...
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Page 39: Distribution Homogène De L'échantillon
Distribution homogène de l'échantillon Pour une meilleure exactitude et la reproductibilité d'un échantillon à l'autre, il convient de s'assurer que l'échantillon est intégralement distribué et qu'il n'adhère pas à l'orifice. Cette homogénéité est particulièrement essentielle pour le micropipetage, en raison de la faiblesse des volumes concernés. Une bonne maîtrise de la distribution accroît la justesse jusqu'à... -
Page 40: Pré-Rinçage Des Cônes
Pré-rinçage des cônes Le pré-rinçage d'un cône à deux ou trois reprises provoque la formation d'un film liquide à l'intérieur du cône qui peut apporter jusqu'à 0,2 % de précision supplémentaire. Le pré-rinçage contribue également à neutraliser les effets de capillarité dans les micropipettes et, pour les pipettes de grand volume, à homogénéiser la température de l'air contenu à... -
Page 41: Éviter Les Variations Thermiques
Éviter les variations thermiques Température ambiante constante La température optimale pour le pipetage est de 21,5 °C ±1 °C (identique à la température utilisée pour l'étalonnage). Évitez les zones soumises aux courants d'air ou exposées au soleil, susceptibles de provoquer de brusques variations de température et de nuire à... -
Page 42: Cohérence Des Paramètres Du Micromètre
Cohérence des paramètres du micromètre Lors du changement du volume d'un niveau supérieur à une valeur inférieure, effectuez le réglage du volume à la valeur inférieure désirée. Toutefois, pour le changement du volume d'un niveau inférieur à une valeur supérieure, tournez le bouton de réglage en ajoutant 1/3 de tour supplémentaire au-dessus de la valeur du volume désiré. -
Page 44: Quel Est Le Risque Lié Au Pipetage
METTLER TOLEDO propose une gamme complète de séminaires sur les GPP et sur la gestion des risques lors des opérations de pipetage. Si vous êtes intéressé, veuillez contacter votre représen- tant commercial Rainin.