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9.
Placer 1000 ml de solution tampon électrolytique dans la chambre inférieure et 200 ml dans
la chambre supérieure. Le tampon de la chambre inférieure peut être utilisé au maximum cinq
fois. Dans la chambre supérieure, le tampon doit être renouvelé à chaque fois. Le tampon doit
être à température ambiante (c'est-à-dire entre 18 et 27 °C).
10. Une fois les deux chambres assemblées et remplies de tampon, vérifier soigneusement
qu'aucun tube ne contient de bulles d'air. S'il y en a, utiliser l'embout du pipeteur pour les
déloger, car elles risquent d'obstruer le passage du courant électrique.
11. Mettre en place le couvercle de la chambre d'électrophorèse et brancher celle-ci sur la
source d'alimentation (fig. 8). Régler la source d'alimentation pour délivrer un courant de 3
mA par tube de gel (ex. : 36 mA pour 12 tubes, 18 mA pour 6 tubes, etc.). La tension doit
être réglée à la puissance maximum (500 V).
12. L'électrophorèse dure approximativement 60 minutes. Arrêter l'électrophorèse lorsque la fraction
HDL se trouve à environ 1 cm du bas du tube de gel dont la migration est la plus rapide.
13. Une fois l'électrophorèse terminée, couper l'alimentation, ôter le couvercle de la chambre et
jeter le tampon électrolytique se trouvant dans la chambre supérieure. Le tampon de la chambre
inférieure peut y rester et être utilisé jusqu'à 5 fois. Ne pas le conserver plus de 7 jours.
14. Avant de retirer les tubes de gel de la chambre d'électrophorèse, essuyer l'excès de
tampon. Les placer ensuite dans le portoir pour préparation afin de les transporter
jusqu'au scanner pour analyse. Laissez les tubes de gel reposer entre 30 minutes
minimum et 2 heures maximum avant de les analyser au scanner.
Figure 7. Chargement des tubes
Figure 8. Chambre assemblée
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