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Utilisation du
formamide
A-4 Préparation du formamide
Pour commencer la purification et mesurer la conductivité :
Etape
Action
10
Si la conductivité est...
>5 µSiemens/cm
<5 µSiemens/cm
Remarque Si la conductivité n'est pas <5 µSiemens/cm après environ 4,5 heures
de mélange, répéter la procédure complète en utilisant un nouveau lot de
formamide et de la nouvelle résine.
Remarque La désionisation est plus efficace quand on commence avec un
formamide de pureté supérieure et une plus faible conductivité.
Pour compléter la purification du formamide désionisé :
Etape
Action
1
Filtrer sous vide le formamide désionisé en utilisant un filtre de téflon ou de nylon
de 0,2 ou de 0,4 µm.
2
Mesurer le volume final du formamide désionisé.
3
Ajouter le volume requis de 200-mM d'EDTA au formamide désionisé pour aboutir à
une concentration finale d'environ 0,3-mM d'EDTA.
Remarque Après l'ajout d'EDTA, la conductivité finale de la formule est augmentée
jusqu'à environ 30 µSiemens/cm. Utiliser l'équation ci-dessous pour calculer le
volume d'EDTA à ajouter.
V
= 1,5V
EDTA (µl)
Où,
V
= volume d'EDTA à ajouter en microlitres
EDTA (µl)
V
= volume mesuré de formamide en millilitres
FORM(ml)
Calcul d'échantillonnage avec un volume final de 90-ml de formamide :
V
= 1,5 x 90 = 135 µl
EDTA(µl)
4
Diviser immédiatement le formamide en aliquots dans des tubes de polypropylène
plus petits et les stocker entre -15 et -20 °C pendant 6 mois maximum.
Au moment de l'utilisation, dégeler et utiliser entièrement un tube à la fois avant
d'ouvrir et d'exposer un autre tube. Entreposer les tubes à 4 °C pendant la journée
dans le cadre d'un emploi intermittent. Sinon, les congeler à nouveau.
Procédure...
Revenir à l'étape 7, et agiter pendant 30 mn
supplémentaires.
Passer à la section « Pour compléter la
purification du formamide désionisé : »
ci-dessous.
Form(ml)
(suite)
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