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Préparation des lames avant le
collage
Pour colorer les lames destinées à être collées sur la
colleuse de lamelles Tissue-Tek Film, il faut utiliser
exclusivement des colorations compatibles avec une colle
de montage à base de solvant. Les colorations pour
lesquelles il faut utiliser une colle de montage aqueuse ne
sont pas appropriées sur cet instrument.
Pour les étapes finales de la coloration d'échantillon, il
faut toujours utiliser du xylène de qualité réactif propre. Il
ne doit pas rester d'eau sur les lames, même en petite
quantité. Cela risquerait d'empêcher l'adhésion du film de
collage. Pour de meilleurs résultats, veiller à changer
fréquemment les derniers bains de xylène dans le
protocole de coloration. Si vous observez de petites bulles
dans les récipients de xylène ou si le xylène présente un
aspect trouble ou coloré, il faut le changer.
Il ne doit pas y avoir de paraffine, de corps étrangers ni
de résidus de coloration sur les lames.
Révisé le 08/08/2013
Cette section explique pourquoi il est important de
retirer l'eau et l'alcool de la lame. Pour assurer une bonne
déshydratation, il est conseillé d'effectuer celle-ci dans
trois (3) bains d'alcool à 100 % pendant au moins 1
minute dans chacun. Par ailleurs, il est indispensable que
le dernier bain d'alcool à 100 % soit parfaitement clair. Si
le dernier bain présente une teinte rose, cela indique la
présence d'eau. L'eau transporte de l'éosine (rose). Il
faudra éventuellement augmenter la rotation de ces
alcools pour éviter que le dernier alcool ne soit trop dilué,
comme dans le traitement des tissus.
Il est important qu'il ne reste aucune trace d'alcool sur
la lame. Il est conseillé d'effectuer trois (3) bains de
xylène pendant au moins 1 minute chacun.
Pour de meilleurs résultats, il convient de prolonger la
durée dans le dernier réservoir de chaque série de réactifs
à 2 ou 3 minutes. Noter que le laboratoire doit revoir
périodiquement la fréquence de rotation du réactif pour
faire face à un surcroît de travail avec les lames.
Avant le collage, il convient de plonger dans du xylène
les lames colorées ou préparées sans xylène lors de
l'étape finale (ex. prélèvements d'hématologie) pendant
plusieurs minutes pour retirer d'éventuelles traces d'huile
ou autres résidus.
Le film de collage est pourvu d'une couche de résine
d'une épaisseur limitée. La résine disponible ne peut pas
s'adapter à de fortes variations d'épaisseur d'échantillon.
Cela risque de provoquer des bulles et de rendre difficile
le diagnostic des échantillons après stockage.
REMARQUE : Les échantillons de cytologie (ex. frottis
cervicaux,
préparations
bronchiaux) peuvent présenter une épaisseur susceptible
de varier dans une large fourchette. Inspecter les lames
pour réduire et/ou limiter les variations d'épaisseur afin
d'obtenir des lames collées de bonne qualité.
Section 2
de
crachats
et
lavages
2.11
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