Leica Kreatech FISH probes Mode D'emploi
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Sommaire des Matières pour Leica Kreatech FISH probes

  • Page 4 Kreatech FISH probes...
  • Page 20 Kreatech FISH probes...
  • Page 21 Ce protocole est développé pour la de recherche uniquement (RUO) Kreatech FISH probes . Pour des résultats optimaux sur les coupes tissulaires incluses dans la paraffine, nous vous conseillons d'utiliser les kits de pré-traitement complets Kreatech (Réf.

  • Page 22: Traitement Des Lames

    Kreatech FISH probes Sinon, vous pouvez également utiliser les protocoles suivants : Traitement des lames : 1. Montez des coupes de tissus de 4 - 6 μm, fixées au formol et incluses dans la paraffine (FFPE), sur des lames chargées positivement.
  • Page 23 Kreatech FISH probes 7. Placez les lames dans de dH O, puis faites incuber pendant 1 min à TA. 8. Placez les lames dans 1 x PBS (pH 7,4) ou dans 2 x SSC (pH 7,0), puis faites incuber pendant 5 min à TA.
  • Page 24 Kreatech FISH probes Préparation de la sonde : Avant utilisation, centrifuger rapidement le tube contenant la sonde, puis passer le brièvement au Vortex et centrifuger de nouveau rapi- dement le tube. Laissez la sonde parvenir à TA avant utilisation. Les sondes Kreatech FISH sont réservées à la recherche uniquement (RUO) et sont fournies prêtes à...
  • Page 25 Kreatech FISH probes puis faites incuber pendant 2 min à 72 °C (±1 °C) sans agiter. À réutiliser une seule fois pour un total de 28 lames. 5. Placez 14 lames maximum dans 200 ml de tampon de lavage frais Wash Buffer II (2 x SSC / Igepal 0,1 %) (Réf.
  • Page 26 Kreatech FISH probes Excitation souhaitable et gamme d'émission pour les fluorophores Kreatech : Fluorophore Excitation Émission PlatinumBright™ 415 429 ±20 nm 470 ±30 nm PlatinumBright™ 495 495 ±20 nm 525 ±30 nm PlatinumBright™ 550 546 ±12 nm 580 ±30 nm Evaluation de la digestion.
  • Page 27 Kreatech FISH probes Foire Aux Questions (FAQ) J'obtiens des signaux faibles, voire pas de signal du tout • Refaites l'hybridation en vous assurant, avant utilisation, que la sonde a été bien mélangée et qu'elle est à TA. • Refaites l'hybridation en vous assurant que la stringence du lavage (tampon de lavage Wash Buffer I) est à...

  • Page 28: Recommandations Concernant La Procédure

    Kreatech FISH probes Qté minimale de sonde à appliquer : Taille de la lamelle en verre Qté minimale de sonde à appliquer 22 x 22 mm 10 μl 22 x 32 mm 15 μl 22 x 50 mm 23 μl Recommandations concernant la procédure :...
  • Page 29 Kreatech FISH probes Matériel requis mais non fourni : équipement : 1. ThermoBrite (Réf. TS-01/02) ou ThermoBrite Elite (Consultez le site Internet www.LeicaBiosystems.com pour en savoir plus) 2. Incubateur à 37 °C 3. Bain-marie avec température précise de 37 °C à 90 °C 4.
  • Page 30 L'AGT cytogénétique de manuels de laboratoire. 3e éd. New York: Raven Press; 1996. Ce protocole est développé pour la recherche uniquement (RUO) Kreatech FISH probes . Pour des résultats optimaux, nous vous conseillons d'utiliser les kits de prétraitement complets Kreatech (Réf. KI-60005, KI-60006) incluant un protocole «...
  • Page 31 Kreatech FISH probes Sinon, vous pouvez également utiliser les protocoles suivants : Prétraitement : Protocole I (protocole standard - si pas suffisant, utilisez le Protocole 1. Pour vieillir les lames, faites les cuire pendant 10 minutes (min) à 80 °C, puis laissez-les refroidir à Température Ambiante (TA).
  • Page 32 Kreatech FISH probes Préparation de la sonde : Avant utilisation, centrifuger rapidement le tube contenant la sonde, puis passer le brièvement au Vortex et centrifuger de nouveau rapi- dement le tube. Laissez la sonde parvenir à TA avant utilisation. Les sondes Kreatech FISH sont réservées à la recherche uniquement (RUO) et sont fournies prêtes à...
  • Page 33 Kreatech FISH probes pendant 2 min à TA. Retirez les lamelles en les faisant glisser. À réutiliser une seule fois pour un total de 28 lames. 4. Placez 14 lames maximum dans 200 ml de tampon de lavage préchauffé Wash Buffer I (0,4 x SSC / Igepal 0,3 %) (Réf. LK-102A), puis faites incuber pendant 2 min à...

  • Page 34: Protocole Alternatif Pour Les Échantillons Cytologie

    Kreatech FISH probes Excitation souhaitable et gamme d'émission pour les fluorophores Kreatech : Fluorophore Excitation Émission PlatinumBright™ 415 429 ±20 nm 470 ±30 nm PlatinumBright™ 495 495 ±20 nm 525 ±30 nm PlatinumBright™ 550 546 ±12 nm 580 ±30 nm Protocole alternatif pour les échantillons Cytologie :...
  • Page 35 Kreatech FISH probes Foire Aux Questions (FAQ) J'obtiens des signaux faibles, voire pas de signal du tout • Refaites l'hybridation en vous assurant, avant utilisation, que la sonde a été bien mélangée et qu'elle est à TA. • Refaites l'hybridation en vous assurant que la stringence du lavage (tampon de lavage Wash Buffer I) est à...

  • Page 36: Avertissement Et Précautions

    Kreatech FISH probes Matériel requis mais non fourni : Réactifs : 1. Kit de réactif FISH (Réf. KI-60005) 2. Kit de digestion FISH (Réf. KI-60006) 3. Formaldéhyde tamponné 1 % / 1 x PBS / MgCl 20 mM 4. 1 x PBS (pH 7,4) 5.
  • Page 37 Kreatech FISH probes 1. Réservé aux professionnels. En cas d'urgence, consultez les fiches FDS pour prendre connaissance des informations liées à la sécurité. 2. Les sondes ADN et les tampons d'hybridation contiennent du formamide (une substance tératogène) ; ne les inhalez pas et ne les mettez pas en contact avec la peau.
  • Page 38 Kreatech FISH probes...
  • Page 55 Kreatech FISH probes NOTES...
  • Page 56 Kreatech FISH probes NOTES...
  • Page 57 Kreatech FISH probes NOTES...

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