Réalisation De Traces De La Concentration; Mesure De La Lumière Parasite - biochrom Libra S4 Notice D'utilisation

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Réalisation de traces de la concentration
Réglez la longueur d'onde du spectrophotomètre sur λ maxi, de la façon décrite
1.
dans l'expérience 1, et relevez l'absorption et la transmission de toutes les
dilutions de la solution mère de bichromate de potassium préparée
précédemment.
2.
Sur le même papier millimétré, préparer deux graphiques, dont un pour
l'absorbance à λ maxi en fonction de la concentration, l'autre pour la
transmission en fonction de la concentration.
Il convient de préciser que le graphique de l'absorbance est linéaire jusqu'à
environ 1,5A, alors que celui de la transmission est exponentiel.
L'aplatissement du graphique de l'absorbance avec des valeurs supérieures est
dû aux lumières parasites. Il est utile d'effectuer une mesure entre 0,1 et 1,0
Abs sur tout spectrophotomètre.
On utilise des graphiques de concentration similaires à celui que nous venons de
tracer pour déterminer la concentration d'un échantillon inconnu de la même
solution (il est d'usage de ne tracer que les valeurs d'absorbance en fonction de la
concentration, et non pas la transmission.), ce qu'on appelle la courbe type.
Si l'absorbance mesurée de l'échantillon inconnu est située à l'extérieur de la section
linéaire du graphique, on peut ramener la valeur dans les limites de cette section
linéaire en utilisant une cuvette ayant une longueur de trajectoire plus courte, ou en
diluant l'échantillon d'un facteur connu. Si l'on choisit une longueur de parcours
plus courte, on doit multiplier l'absorbance observée par un facteur relatif au rapport
des deux longueurs de parcours; p. ex. Si la courbe est basée sur des cuves de 10 nm,
et que l'on utilise une cuve de 5 nm, on doit multiplier par 2. Si l'on sélectionne la
méthode de dilution, on doit calculer la concentration en multipliant l'absorbance par
le même facteur que la dilution, puis relever la valeur d'après le graphique préparé
de la façon décrite ci-dessus.
Mesure de la lumière parasite
1.
Préparez une solution de nitrite de sodium (NaNO
une concentration de 50 g l
de l0 mm.
2.
Réglez la longueur d'onde du spectrophotomètre sur 340 nm, et réglez la
référence (100%T) sans ne rien placer dans le compartiment de l'échantillon
(ou en remplissant la cuvette avec de l'eau distillée).
3.
Placer la cuvette contenant la solution de nitrite de sodium dans le
compartiment porte-échantillon du spectrophotomètre.
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2ème édition - 03/2005
-l
(p.ex. 5g dans 100 ml) et remplissez une cuvette
Libra S4, Français
) dans de l'eau distillée avec
2
25

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