Table des Matières
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VI. Interprétation des résultats
1. Définitions
Le terme « ligne de base » ou « base line » correspond au bruit de fond de la fluorescence
observé pendant les premiers cycles de l'amplification avant que la fluorescence augmente
de façon significative.
Le terme « courbe d'amplification caractéristique » qualifie une courbe de fluorescence avec
une phase exponentielle, une phase linéaire et une phase de plateau.
La « ligne de seuil » ou « threshold line » doit être placée au-dessus de la ligne de base, dans
la phase exponentielle d'une courbe d'amplification caractéristique ou d'un ensemble de
courbes d'amplification caractéristiques.
Le « cycle seuil » ou « threshold cycle » (Ct) d'un puits correspond, pour chaque fluorophore
détecté, à l'abscisse du point d'intersection entre la ligne de seuil et la courbe
d'amplification. La valeur de Ct exprimée par l'appareil pour chaque puits dépend ainsi de la
position de la ligne seuil et de la charge d'analytes initialement présents dans le tube PCR.
Exemple d'une courbe d'amplification caractéristique :
Ordonnées en échelle linéaire
Base line
2. Validation et interprétation des résultats
Afficher l'ensemble des courbes de la plaque en FAM et positionner la ligne de seuil selon les
indications ci-dessus. Procéder de la même façon pour les courbes en VIC/HEX et Cy5.
Ligne de
seuil
Cycles
Ct
Ordonnées en échelle logarithmique
Ligne de
seuil
Base line
Ct
Cycles
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