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le collier de fixation de l'entonnoir. A l'aide de la
pince stérilisé soulever la membrane filtrante hors
de la base de filtration en la saisissant uniquement
par son bord.
14. Retirer le couvercle d'une boîte de Pétri préparée
et poser la membrane, face quadrillée au-dessus, sur un
buvard imbibé du milieu de culture. Commencer par un
coin et faire descendre la membrane en l'aplatissant afin
d'éviter la création de bulles d'air entre la membrane et le buvard.
15. Replacer le couvercle sur la boîte de Pétri et marquer le
haut de la boîte avec un crayon en cire ou un marqueur
indélébile les références du prélèvement, par exemple
le volume filtré, la source, l'heure et la date; ou un code
qui est en rapport avec certaines données sur la feuille de surveillance.
16. Placer la boîte de Pétri, couvercle
au-dessus, dans le vecteur/support et remettre
ce dernier dans le récipient de l'incubateur.
Remettre le couvercle de l'incubateur.
5.8
Re-stérilisation de l'ensemble de filtration
La cuve à prélèvements et l'ensemble de filtration doivent être re-stérilisés entre chaque prélèvement lorsque
deux sources d'eau différentes sont analysées.
La stérilisation de l'équipement sur le terrain présente quelques problèmes pratiques, c'est pourquoi elle doit
être entreprise en suivant une méthode simple. Il est plus pratique d'utiliser du méthanol. Les instructions
sont expliquées ci-dessous. Dans le cas où le méthanol n'serait pas disponible, l'appareil de filtration et la
cuve à prélèvements peuvent être stérilisés en les immergeant dans de l'eau bouillante pendant cinq minutes.
Remarque: Le méthanol est le seul alcool qui convient pour stériliser l'appareil de filtration, il n'y a pas de substitut. Lorsqu'on le
brûle dans un lieu où il y a peu d'oxygène – par exemple dans la cuve à prélèvements fermée – du formol se dégage et devient un
désinfectant très efficace. Le transport de méthanol coûte très cher et nécessite des conditions de transport spéciales. Il est donc en
général préférable de se le procurer localement chez un fournisseur pharmaceutique, un hôpital, ou un laboratoire d'université. Il
n'est en général pas fourni avec le kit. Cependant, s'il est nécessaire, le Centre Robens peut fournir du méthanol sur commande.
1. Essuyer soigneusement la cuve à
prélèvements et l'ensemble de filtration
avec un chiffon ou mouchoir propre.
2. A l'aide du collier en plastique serrer l'entonnoir de filtre au deuxième cran (voir page 30) ce qui
permettra à l'agent stérilisateur de pénétrer.
20
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