Publicité
Le premier filtre (polariseur) laisse passer l'un des plans
de polarisation : la lumière est polarisée. Lorsqu'un
second filtre (analyseur), tourné à 90°, est placé en aval,
la majeure partie de cette lumière polarisée est absor-
bée, car les « grilles » de ce filtre croisé est situé en tra-
vers du plan de polarisation : suppression maximale.
y
z
Polariseur
Polarisator
Si l'on place dans la marche des rayons une substance
(sous forme de solution dans une cuvette) qui tourne
le plan de la lumière polarisée vers la gauche ou vers
la droite dans le sens des aiguilles d'une montre (donc
qui est optiquement active), il faut tourner l'analyseur
pour obtenir de nouveau une suppression maximale.
Exprimé en degrés, l'angle entre la suppression maxi-
male sans et avec le contenu de la cuvette ou entre un
solvant pur et la solution, est déterminé par la rota-
tion de l'analyseur et constitue, outre la concentration
de la substance dissoute et la hauteur de remplissage
de la cuvette, la valeur principale pour la mesure.
4. Commande
• Placer le polariscope de démonstration sur le ré-
troprojecteur et projeter la graduation. L'image doit
être nette.
• Régler le pointeur sur zéro. Tourner l'analyseur pour
obtenir une suppression maximale. Aucune tache
lumineuse de la marche des rayons ne doit appa-
raître à la surface de projection.
• Remplir la cuvette d'un solvant pur et placer le sup-
port.
• Tourner le pointeur à gauche et à droite, jusqu'à ce
que la tache lumineuse apparaisse de nouveau des
deux côtés de la graduation (+/–). La valeur entre
les deux résultats de la mesure constitue le « point
zéro » ou « point de référence » pour les autres
mesures. Dans le cas idéal, il coïncide avec le « 0 »
de la graduation. Exemple : –6° / +4° ; valeur de
référence : –1°
• Puis, placer la cuvette avec la solution de substance
active dans la marche des rayons et déterminer la
hauteur de remplissage pour des calculs ultérieurs.
• Comme pour le solvant pur, déterminer l'angle de ro-
tation des deux côtés de la suppression maximale lors-
que la tache lumineuse apparaît ; par ex. –21° / –11°
donne –16°. Si la valeur de référence du solvant pur
est –1°, l'angle de rotation mesuré a est –15°.
5. Polarimétrie
Des liaisons qui portent en un centre (actif) quatre
substituants ou ligands différents et peuvent être ré-
fléchies sur un plan de réflexion, sont optiquement
actives (chirales).
D
D
Elles se comportent comme une figure et son image et
ne peuvent pas être complètement recouvertes (formes
Analyseur
Analysator
énantiomères). Les substances optiquement actives
tournent le plan de polarisation de la lumière. En pré-
sence de 50% de chaque forme dans un mélange
(racémate), la rotation est annulée vers l'extérieur. Si
l'une des deux formes prédomine, le plan de polarisa-
tion est tourné dans son intégralité. L'angle de rota-
tion á est une constante propre à la substance et dé-
pend, outre du type de particules, des conditions sui-
vantes:
• Longueur d'onde de la lumière : comme la courbe
• Température : dans la plupart des cas, 20 °C sont
• Nombre de particules en rotation : dépend de la
• Solvant.
La rotation qui se rapporte à une certaine quantité
d'une substance optiquement active
(droite, gauche = + ou - ; angle de rotation) est une
constante propre à la substance et désignée comme
rotation spécifique (angle de rotation spéc.).
α [ ]
α
c
d
5.1 Exemples
pour un angle de rotation spécifique
finale) en degrés : D-glucose +52,7 ; D-fructose –92,4 ;
D-mannose + 14,6 ; D-galactose + 80,2 ; D-xylulose
+33,1 ; D-ribose –23,7 ; saccharose + 66,5 ; maltose
+130,4 ; lactose +52,5 (Valeurs extraites de « Aebi,
Einführung in die praktische Biochemie », Karger 1982)
D-glucose α +113,0 (cristallisé à partir d'eau); D-glucose
α +19,0 (cristallisé à partir de pyridin); acide
hydrobutyrique α –24,8; protides –52,8 (Valeurs extrai-
tes de « Rapoport/ Raderecht, Physiologisch-chemisches
Praktikum », VEB Verlag Volk u. Gesundheit, 1972).
8
Spiegelebene
Plan de réflexion
A
z
B
C
de D-sodium de la lumière émissive (lampes à va-
peur au Na) est utilisée pour des mesures exactes,
un filtre jaune se trouve sous l'appareil pour obte-
nir approximativement cette gamme spectrale.
indiqués pour les mesures.
concentration de substance dissoute et de l'épais-
seur de couche de la solution (= hauteur de rem-
plissage de la cuvette) ; rapport proportionnel.
α
± ⋅
20
α
=
[ ]
D
20
= angle de rotation spécifique pour courbe D
D
Na et 20°C.
= angle de rotation mesuré (lecture sur la gra
duation)
= concentration en gramme/100 ml (g/0,1 dm3)
de solution.
= épaisseur de couche (hauteur de remplissage)
en dm.
A
z
B
C
D
100
⋅
c d
α [ ] D 20
(rotation
Publicité
