Comparaison D'intensité; Acquérir Une Image En Transmission; Zoom; Echantillonnage Spatial - Leica SP8 Mode D'emploi

3.4.3 Comparaison d'intensité
Si vous souhaitez faire une étude d'intensité sur vos images, faites d'abord vos réglages (laser, gain)
sur l'échantillon le plus brillant et gardez ces paramètres pour acquérir les images suivantes. Ainsi,
les autres échantillons ne seront pas saturés. De même, les améliorations d'images (contraste par
exemple) doivent d'abord être faites sur l'image la plus brillante puis appliquer de la
même manière sur les autres images.
3.4.4 Acquérir une image en transmission
Pour acquérir en transmission, sélectionnez une configuration avec Trans.
On peut voir que dans une séquence le PMT de la transmission est activé.
La transmission est acquise simultanément avec un canal fluo: la source d'excitation
(le laser) est donc commune et sa valeur est la même pour le canal fluo et pour le canal de la
transmission. Il faut donc en premier régler la puissance laser sur la fluorescence et ensuite pour
régler la transmission jouer uniquement sur le gain du PMT de la transmission. Avec la barre de
boutons de réglage, réglez le gain du PMT de la transmission.

4. Zoom

Vous pouvez directement zoomer sur la zone de votre choix en arrêtant le
LIVE puis en cliquant sur Zoom in dans l'onglet XY. Encadrez ensuite sur
l'image la zone à zoomer puis cliquer sur Start pour acquérir.
Dans l'onglet XY, pouvez voir et changer vos paramètres de zoom dans Zoom
factor. Il est aussi possible de dézoomer jusqu'à un facteur de 0,75 pour imager
une plus grande surface.

5. Echantillonnage spatial

- La résolution dépend de l'objectif : r =
- La taille du pixel est ajustable. Selon le théorème de Nyquist, l'échantillonnage idéal doit être de :
r
2.3
Objectif
ON
r (à 543 nm)
Echantillonnage
idéal
Taille
(512x512)
Zoom =1
Plateau technique d'imagerie cellulaire d'Infinity-Purpan
Sophie Allart - sophie.allart@inserm.fr
0.4 

20X
0.8
271.5 nm
118 nm
du pixel 1,14 µm
– Simon Lachambre –
Tél : 05. 62. 74. 45. 78
05. 31. 54. 79. 01
40X 63X
1.3 1.4
167 nm 155 nm
72.6 nm 67.5 nm
361 nm
simon.lachambre@inserm.fr
7