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Paramètres de synchronisation pour la fluorescence résolue en temps
Temps du repos
4.5.3
Mode rapport de FI
Mode rapport
Temps de commutation de filtre (configurations F de l'Infinite)/ Temps de
commutation de longueur d'onde (configurations M de l'Infinite)
2021-06
Notice d'utilisation pour Infinite 200 PRO n° 30160738
Pour la TRF, les paramètres d'intégration du signal doivent être ajustés en
fonction de l'étiquette. Un retard décale le début du temps d'intégration du signal
par rapport au flash précédent. Les paramètres de synchronisation de la TRF
peuvent être définis en procédant comme suit :
Vous pouvez prendre comme point de départ la durée de vie de fluorescence de
l'étiquette pour le temps d'intégration et le retard.
Réglage grossier : Avec un temps d'intégration fixe, réduisez le retard pour
maximiser le rapport signal/fond (S/B).
Réglage précis : Avec un retard fixe, augmentez le retard et vérifiez si le S/B
s'améliore.
Réglage précis facultatif : Avec l'un des deux paramètres de synchronisation fixe,
vous pouvez faire varier l'autre paramètre et vérifier si le S/B s'améliore
davantage.
Avant de mesurer un puits, un temps du repos peut être défini. En raison du
mouvement d'arrêt et de reprise du porte-plaque, le ménisque du liquide distribué
peut encore vibrer tandis que le signal est intégré. Ceci peut entraîner des
fluctuations des valeurs mesurées. L'effet a été observé dans des puits de
plaques à 96 puits et des puits plus grands. Ceci est essentiel en particulier avec
des mesures d'absorbance.
Jusqu'à 4 étiquettes peuvent être mesurées par puits. Ce mode de mesure est
appelé mode rapport. Veillez à ce qu'aucun calcul de rapport ne soit effectué
après cette mesure. La feuille de résultats Excel indique les données brutes. Des
calculs ultérieurs doivent être réalisés par l'utilisateur.
Les configurations F de l'Infinite peuvent commuter entre deux filtres dans un
délai de 250 ms si les étiquettes sélectionnées sont mesurées avec un gain
identique. Sinon, le temps de commutation est de 400 ms. Dans ce cas, le niveau
haute tension sur le PMT doit être modifié. La haute tension appliquée au PMT
nécessite un certain temps pour se stabiliser.
Les configurations M de l'Infinite peuvent commuter entre deux longueurs d'onde
dans un délai de 150 ms si les étiquettes sélectionnées sont mesurées avec un
gain identique ou si aucun point de commutation optique (OS) n'est impliqué (voir
le Tableau 1 : pour les points de commutation). Sinon, le temps de commutation
est de 400 ms. Dans ce cas, le niveau haute tension sur le PMT doit être modifié.
La haute tension appliquée au PMT nécessite un certain temps pour se stabiliser.
La roue porte-filtres OS doit être déplacée.
4. Utilisation de l'instrument
version 1.4
65
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