Séquençage; Introduction; Durée De Lʼanalyse; Génération D'amplifiats - illumina MiSeqDx avec MOS v4 Guide De Référence

Guide de référence de l'instrument MiSeqDx avec MOS v4
Séquençage

Introduction

Pour exécuter une analyse sur le système MiSeqDx, suivez les étapes de configuration décrites dans ce
chapitre. Après le lancement de l'analyse, aucune intervention supplémentaire de l'utilisateur n'est
requise.
Une fois l'analyse de séquençage terminée, effectuez un lavage de l'instrument.
Durée de lʼanalyse
La durée de l'analyse dépend du nombre de cycles réalisés. Selon la version des réactifs MiSeqDx,
l'instrument MiSeqDx peut faire des analyses de séquençage à lectures appariées pouvant comporter
jusqu'à 2 x 301 cycles de séquençage.
Nombre de cycles d'une lecture
Chaque lecture comprend un cycle de plus que le nombre de cycles analysés. Le cycle supplémentaire
est requis pour les calculs de mise en phase et en préphase.
Par exemple, une analyse de 150 cycles à lectures appariées effectue deux lectures de 151 cycles
(2 × 151), pour un total de 302 cycles, plus les cycles des lectures d'index. À la fin de l'analyse,
2 × 150 cycles sont analysés.
Génération d'amplifiats
Lors de la génération d'amplifiats, les molécules d'ADN uniques sont liées à la surface de la Flow Cell,
puis subissent une amplification en pont de façon à former des amplifiats.
Séquençage
Une fois les amplifiats générés, ils sont imagés à l'aide de combinaisons de DEL et de filtres propres à
chacun des quatre didésoxyribonucléotides à marqueur fluorescent. Une fois l'imagerie d'une plaque de
la Flow Cell terminée, la Flow Cell est déplacée de manière à exposer la plaque suivante. Le processus
est répété jusqu'à ce que toutes les plaques soient imagées. Après l'analyse de l'image, le logiciel
procède à l'analyse primaire, qui comprend une identification des bases, un filtrage et une évaluation
de la qualité.
Document nº 200010452 v00 FRA
DESTINÉ AU DIAGNOSTIC IN VITRO UNIQUEMENT
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