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Résolution des problèmes
C. Processus lent inversé
Processus utilisant un protocole de nettoyage modifié durant une période égale au temps requis pour
continuer le traitement du tissu (→ p. 179 – Protocole de nettoyage inversé lent) Retraitez ensuite avec
du formol en utilisant un programme adapté à la taille et à la nature de l'échantillon (→ p. 157 – 10.2.1
Type d'échantillon et durée d'un protocole)
Un processus lent inversé est très favorable pour le tissu. Si le temps le permet, il s'agit de la meilleure
option.
7. Tissu affecté par le formol pendant le rinçage ou l'infiltration de paraffine
Ce problème peut survenir si une valve qui fuit permet au formol de s'écouler dans le bain de paraffine.
Contactez l'assistance client pour tester l'appareil si vous rencontrez ce problème.
Une contamination au formol est caractérisée par une nuance bleue dans les noyaux, la perte de
détail de la chromatine, le rétrécissement nucléaire, une éosinophilie variable et un gonflement et/ou
rétrécissement cytoplasmique.
Vous devez d'abord faire fondre les blocs, éliminer l'excès de paraffine puis placer les échantillons
dans de nouvelles cassettes. Ceci minimise la contamination à la paraffine des réactifs de traitement.
Ensuite, retraitez les blocs avec l'une des méthodes indiquées pour le problème 6. Puis, trempez dans
une solution de prélèvement à pH élevé Tris-HCl (par ex. Leica BOND solution de prélèvement Epitope 2)
pendant 2 à 12 heures à température ambiante.
Ce traitement permet d'améliorer les qualités de coloration de HE & HES, les qualités de coupe du tissu
et la cohésion de la coupe. Le détail nucléaire, le gonflement cytoplasmique et la définition ne sont
probablement pas améliorés.
8. Tissu sous-traité fixé de manière inadéquate
Une solution possible est d'effectuer un traitement inversé lent du tissu (→ p. 178 – C. Processus lent
inversé), d'appliquer une fixation au formol additionnelle, puis de retraiter en utilisant un programme
adapté à la taille et à la nature de l'échantillon
protocole).
Le tissu non fixé ou mal fixé est endommagé par le traitement. L'éthanol et les températures élevées
produisent un effet fixateur différent de celui du formaldéhyde. Par conséquent, les blocs ont plus
tendance à se durcir et à rétrécir. S'ils sont associés à un sous-traitement, les blocs peuvent devenir
inutilisables.
Protocole de nettoyage inversé rapide
Étape Type de réactif
1
Solvants de nettoyage
2
Éthanol de nettoyage
Durée de traitement :
178
(→ p. 157 – 10.2.1 Type d'échantillon et durée d'un
Durée
Temp.
(min)
(°C)
12
65
6
55
18
P/V
Agitateur
Ambiante
Marche
Ambiante
Marche
Version 1,1, Révision B
Temps
d'égouttage
10
10
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