Leica BIOSYSTEMS HistoCore PEGASUS Mode D'emploi page 177

Dispositif de traitement de tissu
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Résolution des problèmes
4. Tissu dur, ratatiné et desséché, mais traité dans la paraffine
Éliminez la paraffine et réhydratez tel que décrit dans le problème 6, ci-dessous. Appliquez une solution
de reconstitution tel que décrit dans le problème 3.
5. Tissu insuffisamment infiltré avec la paraffine
Replacez les cassettes dans le bain de paraffine en appliquant un vide et en actionnant l'agitateur à une
température de 65 °C. Cette procédure peut être nécessaire lorsque le tissu a été retiré prématurément de
la paraffine.
6. Tissu sous-traité fixé de manière appropriée
Ce problème peut être dû à un protocole trop court, un spécimen trop grand ou une défaillance du
préparateur. Quatre solutions sont recommandées mais le problème doit d'abord être identifié et corrigé.
Testez la correction en passant un tissu de contrôle dans le préparateur avant de retraiter le tissu du
patient (ou utilisez un autre préparateur).
Remarque : Pour les solutions suivantes, vous devez d'abord faire fondre les blocs, éliminer l'excès de
paraffine puis placer les échantillons dans de nouvelles cassettes. Ceci minimise la contamination à la
paraffine des réactifs de traitement.
A. Méthode de Taggart
Placez les cassettes dans un bécher de solution saline isotonique (solution aqueuse de 0,9 % de chlorure
de sodium) dans un incubateur à 65 ºC pendant 1 heure. La paraffine monte à la surface. Retirez le tissu
et retraitez dans du formol en utilisant un protocole adapté à sa taille et à sa nature (→ p. 157 – 10.2.1
Type d'échantillon et durée d'un protocole).
La solution saline réhydrate le tissu en douceur et il peut ensuite être traité normalement. La solution
saline est un réactif non toxique qui peut être utilisé en toute sécurité dans un laboratoire ouvert.
B. Processus rapide inversé
Processus utilisant un protocole de nettoyage rapide modifié (→ p. 178 – Protocole de nettoyage
inversé rapide). N'utilisez pas le protocole de nettoyage rapide par défaut ou les protocoles dérivés,
car ils se terminent par une étape de séchage qui endommage le tissu. Après le protocole de nettoyage,
retraitez avec du formol en utilisant un programme adapté à la taille et à la nature de l'échantillon
(→ p. 157 – 10.2.1 Type d'échantillon et durée d'un protocole)
Les réactifs de nettoyage du préparateur fournissent une méthode automatique pratique pour éliminer
la paraffine et remettre le tissu dans l'éthanol. Toutefois, cette méthode peut être plus rude que les
méthodes A ou C.
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