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tecan SUNRISE Notice D'utilisation page 58

Lecteur d'absorbance pour microplaques
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6. Contrôle qualité
Linéarité de l'instrument avec des échantillons liquides
6.3.5
Exemple pour un instrument à longueur d'onde réglable
58
Pour vérifier la linéarité de l'instrument, utiliser la dilution sérielle d'une solution.
Le résultat dépend de la pureté du colorant utilisé et du ménisque du liquide dans
les puits.
Pour référence, une dilution sérielle d'orange de Méthyle dans 0,1 % de solution
Tween 20 pour des mesures à 492 nm peut être utilisée.
Les séries de dilutions doivent se trouver dans la gamme de 0,1 à 3,0 DO pour
un instrument à 4 filtres / 6 filtres et dans la gamme de 0,1 à 2,5 DO pour un
instrument à longueur d'onde réglable.
Pour d'autres longueurs d'onde, utiliser d'autres solutions.
Pipeter alors 250 microlitres de chaque dilution sur la microplaque. Utiliser au
moins deux échantillons pour chaque dilution afin de réduire les erreurs liées au
pipetage.
Vérifier que l'instrument est en mode de mesure Exact.
Mesurer alors la microplaque et tracer un graphique de régression linéaire de DO
par rapport à la concentration depuis la moyenne des valeurs DO mesurées.
Déterminer le carré de la valeur résiduelle non pondéré R² de la ligne de
régression.
Des carrés de valeurs résiduelles typiques pour une application standard sont
égales ou meilleures que R²=0,998.
Les données peuvent varier en raison de l'inexactitude du pipetage, du
ménisque des liquides et de l'application utilisée.
Les limites de la linéarité de l'instrument seront mesurées avec la plaque
Lectures 0,100 à 2,500 DO
Facteur de dilution
1
0,5
0,25
0,125
0,0625
0,03125
0
Equation pour une régression linéaire :
y = 2,5911x + 0,0298
Carré de la valeur résiduelle : R
Notice d'utilisation du SUNRISE n° 30213637 rev n° 1.0
Note
Note
de QC.
Absorbance
2,621 DO
1,323 DO
0,679 DO
0,360 DO
0,192 DO
0,110 DO
0,025 DO
2
= 1
2022-04

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