Table des Matières
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4 Description de l'instrument
4.9
Alignement des images
Pour les systèmes à plusieurs caméras, les images de toutes les caméras doivent
être alignées les unes par rapport aux autres, car l'ajustement mécanique n'est jamais
parfait. Même si le désalignement restant ne représente que quelques pixels, cela
serait visible dans les images d'échantillon résultantes. De plus, il peut y avoir des
distorsions à l'intérieur d'une image, causées par exemple par des aberrations des
objectifs ou un miroir déformé. C'est pourquoi il est utile de réaliser un alignement des
images, même pour les systèmes à une seule caméra.
L'Opera Phenix dispose désormais d'une procédure d'alignement des images
entièrement automatique utilisant un échantillon d'alignement propriétaire fixé à la
table de balayage. Les images de cet échantillon durable sont acquises à chaque fois
qu'une mesure (test) est lancée. L'alignement des images est ignoré pour les
instantanés afin d'accélérer la configuration de l'essai. La seule exception est le canal
FRET, où un alignement des images est également réalisé pour les instantanés
lorsque deux canaux sont acquis. Si une mesure ultérieure possède les mêmes
réglages optiques, les paramètres d'alignement des images sont réutilisés.
Les structures détectées dans les images acquises de l'échantillon d'alignement sont
ensuite mappées sur l'image idéale de l'échantillon, et une transformation d'image est
ainsi calculée pour chaque canal. Cette transformation est appliquée à chaque image
de la mesure ultérieure et les images corrigées sont enregistrées et affichées. Un
contrôle de qualité est intégré à la procédure d'alignement. Si l'alignement ne réussit
pas le contrôle, la procédure est répétée. Dans tous les cas, une mesure ne sera
lancée que si le contrôle de qualité est réussi, ce qui évite que les images de vos
analyses ne soient alignées de manière sous-optimale.
Si la procédure d'alignement des images échoue de manière répétée, nettoyez d'abord
l'objectif. Si cela n'entraîne pas d'amélioration, veuillez consulter l'aide en ligne
d'Harmony, section « Image Alignment Procedure Fails Repeatedly » pour le
dépannage.
Sachez que pendant que l'instrument chauffe (surtout si Environmental Control
[Contrôle de l'environnement] est utilisé) les propriétés optiques du système peuvent
changer, de sorte que les paramètres d'alignement précédemment calculés ne
s'adaptent plus de manière optimale. Il est donc recommandé de déclencher un
alignement des images juste avant de réaliser votre mesure.
Une façon simple de remplacer les paramètres existants est de passer du mode
confocal au mode non confocal, ou vice versa, et de cliquer sur Test. Ensuite, vous
définissez à nouveau les réglages de votre essai et, une fois que vous aurez lancé la
mesure, l'alignement de l'image sera répété automatiquement.
Veuillez noter que la procédure d'alignement nécessite le laser UV (405 / 425 nm) et
que vous ne pourrez pas continuer à mesurer sans ce dernier.
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Opera Phenix Plus – Manuel d'utilisation
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