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100x /1,40 HCX PL APO Oil (11506038)
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Lamelle couvre objet 0,17mm obligatoire
–
immersion à huile
–
Dist. de travail : 0,09mm
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Champ maximal : 155x155µm (confocal)
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Cet objectif offre des résolutions identiques à celles du 63x !
2-1-2 Le condenseur
Il s'agit d'un modèle S28 qui fourni une ouverture numérique de 0,55 avec une distance de travail minimale
de 28mm. Il convient pour les grossissements de 1.25x à 100x.
La tourelle du condenseur est motorisée pour ses éléments optiques avec :
–
4 gros orifices pour prismes, arrêt DF, BF, anneaux PH
–
3 petits orifices pour BF, anneaux PH
Le diaphragme d'ouverture est également motorisé.
2-1-3 La platine
Elle est composée :
- d'une platine motorisée XY permettant d'acquérir une mosaïque d'images afin de reconstituer une vue
élargie des échantillons, ou d'imager différentes positions d'un échantillon avec la possibilité de se
repositionner sur ces points au cours d'un time-lapse.
- d'une sur-platine garantissant des déplacements rapides et un positionnement en Z (Z-galvo) précis
(précision de 40 nm sur une épaisseur de 1.5 mm). Cette sur-platine peut être équipée de différents
portoirs : pour lame, boite de pétri, plaque à puits et chambre de culture.
L'ensemble du statif est placé dans un incubateur avec régulation de température et circulation de CO2.
2-1-4 L'excitation de fluorescence
Elle est assurée par une source de lumière fibrée Leica
EL 6000 dont les principaux avantages sont :
pas d'alignement nécessaire
•
pas d'échauffement de la préparation
•
durée de vie >2000h
•
une intensité légèrement plus forte que les
•
lampes HBO dans le canal FITC/eGFP
cinq niveaux d'atténuation mécaniques : 0 ;
•
12,5 ; 25 ; 50 ; 100%
Les domaines spectraux d'observation sont déterminés par 3 cubes filtres différents :
- combinaison filtres A (exc. 340-380/ dichr. 400 / émission LP 425) pour le Dapi ou le Hoechst.
- combinaison filtres I3 (exc. 450-490/ dichr. 510 / émission LP 515) pour la FITC, l'Alexa 488, l'eGFP, etc.
- combinaison filtres N2.1 (exc. 515-560/ dichr. 580 / émission LP 590) pour la TRITC, la Cyanine 3, les
Alexa 546, 555 et 568, etc.
2-2 Le système confocal
Les sources d'excitation laser sont les suivantes :
405 nm
- diode
(<7mW dans le plan focal)
458, 476, 488, 496, 514 nm
- laser Argon
561
- diode DPSS
nm (<12mW dans le plan focal)
633
- laser He/Ne
nm (<5mW dans le plan focal)
Pour l'émission de fluorescence, un dispositif AOBS (Acousto Optical Beam Splitter) permet de sélectionner
très finement la gamme de longueurs d'onde imagée et remplace les filtres dichroïques. De ce fait, il n'y a
plus de distorsions de l'intensité du signal telles que celles engendrées par l'utilisation des dichroïques.
4 canaux en fluorescence de 400 à 800 nm et 1 canal en transmission (Brightfield, DIC)
Modes d'acquisition : xyz – xzy – xt – xyt – xzt – xzyt – xyλ – xzλ – xyλz – xyλt – xzλt – xyzλt
Définition des images : jusqu'à 8192²
Dynamique des images : 8, 12 ou 16bits
(<50mW dans le plan focal)
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