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10.
MODE MULTI-LONGUEURS D'ONDE
10.1.
PRINCIPE DE MESURE
Ce mode de mesure permet de faire différents calculs sur une solution mesurée à plusieurs longueurs d'onde (ratio,
correction d'Allen,...), mais permet aussi d'avoir la valeur en absorbance d'une solution à différentes longueurs d'onde
(jusqu'à 10).
La formule utilisée est
Equation 1
+
+
a
0
a
. 1
A
1
a
. 2
A
=
R
+
+
b
0
b
. 1
A
1
b
. 2
A
R
est le résultat du calcul.
a
, 0
a
, 1
a
2
,...
a
10
,
b
, 0
b
, 1
A
, 1
A
2
,...,
A
10
sont les absorbances lues aux différentes longueurs d'onde.
L'opérateur doit choisir judicieusement la valeur des facteurs a0, a1, a2,...a10 et des facteurs b0, b1, b2,...,b10 de telle
façon que l'équation générale (Equation 1) s'identifie au calcul à exécuter. Voir les exemples ci-après.
10.2.
CALCULS
Détermination de l'indice de pureté de l'ADN.
L'indice de pureté de l'ADN est donné par le ratio de l'absorbance lue à 260 nm sur l'absorbance lue à 280 nm avec
élimination d'un trouble par une mesure à 320 nm.
Equation 2
−
Abs
=
260
nm
R
−
Abs
280
nm
Pour convertir l'équation générale 1 en l'équation 2, il faut faire la programmation suivante :
LO
Longueur d'onde 1
Longueur d'onde 2
Longueur d'onde 3
Longueur d'onde 4
Longueur d'onde 5
Longueur d'onde 6
Longueur d'onde 7
Longueur d'onde 8
Longueur d'onde 9
Longueur d'onde 10
+
+
2
...
a
10
.
A
10
+
+
2
...
B
10
A
10
b
2
,...
b
10
sont les coefficients qui permettent les calculs sur les absorbances.
Abs
320
nm
Abs
320
nm
(nm)
Abs (nm)
260 nm
A1
Abs (260 nm)
280 nm
A2
Abs (280 nm)
320 nm
A3
Abs (230 nm
A4
A5
A6
A7
A8
A9
A10
- 55 -
a
Valeur
b
a0
0
b0
a1
1
b1
a2
0
b2
a3
-1
b3
a4
0
b4
a5
b5
0
a6
0
b6
a7
0
b7
a8
0
'b8
a9
b9
0
a10
0
b10
Valeur
0
0
1
-1
0
0
0
0
0
0
0
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