Table des Matières
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Dépannage
problème
Échantillon déformé bien
Les échantillons ne fonctionne pas selon
une trajectoire rectiligne
Double-banded structure
Résolution bande Pauvre
Patins en mousse Décoller
•
p10
solution
L aisser le gel à définir pour un minimum de 30 minutes et
assurez-vous qu'il est à température ambiante avant de retirer
le peigne.
L orsque vous retirez le peigne, le maintenir à un léger angle
et soulever très lentement pour éviter le gel de se casser.
P renez soin de ne pas endommager le puits avec la pipette
lors du chargement de l'échantillon; objectif pour le centre du
puits et ne pas percer le fond avec la pointe de la pipette.
Si un plateau peigne ou en cours d'exécution est déformé,
remplacez.
Réduire la tension.
C hoisissez un tampon avec la force ionique et appropriée
capacité tampon. (La capacité tampon de TBE, par exemple,
est supérieure à celle de TAE.) Si la mémoire tampon est
vide, arrêter la course, enlever le couvercle, et le tampon
pipeter de chaque chambre dans la chambre opposée à
reconstituer le tampon.
S i le gel est inégale, le niveau du bac de coulée avant de
verser le gel.
L e peigne doit être verticale afin d'éviter la déformation du bien.
D iminuer le niveau de tampon et 1 mm au-dessus du haut du
gel, pour réduire le gradient de température vertical.
A jouter de Ficoll
™
, le glycérol, le saccharose ou le tampon de
chargement de l'échantillon pour assurer que l'échantillon
coule au fond du puits. (Ficoll est préférable.)
A ssurez-vous que l'échantillon soit complètement dissoute.
Réduire la tension.
Réduire la concentration de l'échantillon.
Réduire le volume de l'échantillon.
A u moins 1 mm de gel de dessous du fond du peigne est
nécessaire pour empêcher échantillons de fuir hors du fond
du puits.
Réduire la concentration en sel de l'échantillon.
V érifiez l'activité enzymatique; l'échantillon peut exiger plus
de digestion ou d'un tampon de restriction différente.
P réparer l'échantillon frais si vous suspecter une contamina-
tion nucléase.
Choisissez d'agarose avec une valeur faible endosmose.
I nstallez le bac fonctionne comme tel que décrit à la page 5,
ne pas appuyer sur vers le bas en place.
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