QBC Diagnostics F.A.S.T. Instructions D'utilisation

Innovative Solutions for a Healthier World
F.A.S.T. QBC Kit de démarrage pour
TM
frottis BAAR
Utilisation prévue
Pour utilisation dans la préparation de frottis d'échantillons ou
cultures de patient pour la détection ou la caractérisation de bacilles
acido-alcoolo-résistants tels que Mycobacterium tuberculosis.
Résumé et principes
L'incidence mondiale de la tuberculose est en augmentation au
moins depuis 1990, lorsque l'Organisation Mondiale de la Santé a
commencé à suivre les données d'incidence
et précise de la tuberculose est essentielle pour le contrôle et le
traitement efficaces de la maladie. La méthode la plus courante
pour la détection de Mycobacterium tuberculosis est l'examen
microscopique de frottis d'expectoration
diagnostic provisoire initial ainsi que la quantification de la charge
mycobactérienne.
Des bacilles acido-alcoolo-résistants, tels que Mycobacterium
tuberculosis, peuvent être colorés par des colorants d'aniline et
sont résistants à la décoloration par un acide et un alcool. Lorsqu'il
est suivi par une coloration de contraste, ce traitement conduit à
la coloration des bacilles acido-alcoolo-résistants par contraste par
rapport aux autres organismes et aux débris qui n'ont conservé que
le colorant de contraste. Cependant, les méthodes de coloration
conventionnellement utilisées pour l'examen microscopique des
organismes conduisent à un frottis dont l'interprétation est longue
et difficile. Les colorations à l'auramine O et l'auramine-rhodamine
ont été utilisées avec succès pour la microscopie de fluorescence des
mycobactéries. Les publications sur le mécanisme de coloration sont
contradictoires ; celles-ci mentionnent la liaison de l'auramine O à la
paroi cellulaire des mycobactéries
voire l'intégralité du colorant auramine O à l'acide nucléique dans
les mycobactéries . Cependant, il a été démontré que les méthodes
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de coloration à base d'auramine O sont plus sensibles que les
méthodes de microscopie optique pour la détection des bactéries
acido-alcoolo-résistantes . Cette augmentation de sensibilité est
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due, en grande partie, au contraste significatif que les colorations
fluorescentes confèrent aux organismes acido-alcoolo-résistants,
qui apparaissent en vert sur fond sombre. Cette augmentation de
contraste permet d'utiliser des objectifs à champs plus larges, et
donc de diminuer la durée totale de l'examen.
Les produits F.A.S.T. BAAR QBC sont basés sur des technologies
de fluorescence et de coloration exclusives et sont conçus pour
utilisation dans l'ensemble des étapes de collecte, préparation et
examen des échantillons. Ce kit d'essai constitue un échantillonnage
de certains des produits F.A.S.T., comprenant le kit de coloration
à l'auramine O F.A.S.T., qui simplifie le processus de coloration en
utilisant une coloration propriétaire et une combinaison d'agent
désactivant/décolorant pour une procédure rapide en quatre étapes
qui dure à peine plus de 2 minutes.
Contenu
Le kit de démarrage pour frottis BAAR F.A.S.T. QBC contient
•
3 récipients de collecte d'échantillon
• 3 écouvillons
•
3 lames SureFocus
•
5 ml de colorant TB auramine O F.A.S.T.
• 5 ml décolorant/désactivateur F.A.S.T.
•
1 lame témoin RAAN F.A.S.T.
®
Diagnostics
. La détection précoce
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, qui permet à la fois un
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et la liaison de la majeure partie,
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Conditions de conservation
Conserver à 15 – 25 °C. Éviter une chaleur excessive. Ne pas utiliser
après la date d'expiration.
Avertissements et précautions
Pour utilisation diagnostique in vitro
Des échantillons cliniques humains peuvent être porteurs de
maladies infectieuses tels que les agents causals de la tuberculose,
l'hépatite, le virus d'immunodéficience humaine (VIH), etc. Respecter
les précautions générales et les directives et réglementations locales
pour la manipulation d'échantillons cliniques. Toutes les activités qui
peuvent générer des aérosols à partir d'échantillons cliniques doivent
être conduites dans une enceinte de biosécurité. Les activités qui
mettent en œuvre la culture de Mycobacterium tuberculosis doivent
être conduites en utilisant des procédures et pratiques de biosécurité
de niveau 3.
Les substances chimiques contenues dans ce kit sont dangereuses et
peuvent causer des blessures ou être mortelles. Utiliser ce produit dans
une zone correctement ventilée avec un équipement de protection
personnelle approprié. Maintenir le produit à l'abri des flammes nues.
Consulter la fiche de sécurité du kit de coloration à l'auramine O F.A.S.T.
pour plus d'informations concernant la sécurité et l'élimination des
produits.
Ce produit est destiné à faciliter la détection des bacilles acido-
alcoolo-résistants. La microscopie de frottis d'expectoration et les
procédures mises en œuvre dans la préparation et le traitement des
échantillons pour la détection de BAAR doivent être conduites par
du personnel formé aux techniques utilisées ainsi qu'aux pratiques et
procédures générales de laboratoire appliquées.
Attention : ce produit contient des lames de verre. Manipuler avec
précaution.
Instructions d'utilisation
Les cuvettes de collecte d'expectoration, les écouvillons et les lames
SureFocus sont à usage unique exclusivement.
TM
Les lames SureFocus peuvent être utilisées avec des échantillons de
patient directs, des échantillons digérés ou des échantillons mis en
culture.
Préparation de frottis et coloration :
Ajouter l'échantillon au centre de la lame SureFocus et frotter
pour former un frottis uniforme qui s'étend de manière à occuper
l'intégralité de la zone de l'ellipse. Le frottis doit être assez épais pour
assurer qu'une quantité suffisante d'échantillon a été ajoutée. Pour
les frottis directs, les traits de la lame SureFocus doivent encore être
visibles à travers l'échantillon. Fixer la lame par la chaleur en utilisant
un brûleur ou un chauffe-lame.
Procédure de coloration :
1. Fixer par la chaleur une lame contenant un échantillon
de frottis.
2. Recouvrir le frottis avec le colorant auramine O F.A.S.T.
et laisser au repos pendant 1 minute.
3. Rincer doucement le frottis avec de l'eau déminéralisée
ou de l'eau de distribution et évacuer le rinçage.
4. Recouvrir le frottis avec le décolorant/désactivateur
F.A.S.T. et laisser au repos pendant 1 minute.
5. Rincer doucement le frottis avec de l'eau déminéralisée
ou de l'eau de distribution et évacuer le rinçage.
6. Sécher la lame.
Procédure d'examen :
Examiner la lame en utilisant le système ParaLens QBC ou un système
de microscopie de fluorescence équivalent. Colorer la lame fixée
par la chaleur en utilisant une procédure à l'auramine O telle que
l'auramine O F.A.S.T. Remarque : il est recommandé d'inclure un
échantillon de témoin positif et négatif avec chaque lot de lames
colorées afin de contrôler l'intégrité du réactif et de l'instrument ainsi
que l'exécution de l'opérateur.
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