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Guides de bonnes pratiques
1.2
1. Le choix des longueurs d'onde d'excitation et d'émission optimales (filtres) est crucial
pour obtenir les meilleures performances d'analyse.
2. Tous les fluorimètres doivent être installés dans un endroit propre, sec et sans
poussière. Pendant leur utilisation, les niveaux ambiants de température et de lumière
doivent demeurer aussi constants que possible.
3. Le respect des Consignes Permanentes (CP) et des Bonnes Pratiques de
Laboratoire (BPL) doit être permanent, avec des vérifications régulières de
l'étalonnage et un programme de Contrôle Qualité (CQ) approprié.
4. Il est impératif de bien choisir les cuves pour obtenir des résultats précis et
reproductibles :
a) Vérifier que toutes les cuves utilisées sont compatibles avec les mesures de
fluorimétrie, le faisceau d'émission étant à 90° par rapport à la source
d'excitation. La cuve type possède 4 côtés transparents.
b) Vérifier que la fluorescence naturelle du matériau de la cuve est minimale aux
longueurs d'onde utilisées.
c) Utiliser une seule fois les cuves en plastique.
d) Nettoyer soigneusement les cuves en verre et en quartz après usage. Les jeter
en cas de rayures ou marques visibles sur leurs surfaces optiques.
e) Vérifier que les produits de nettoyage utilisés ne fluorescent pas aux longueurs
d'onde utilisées. Bien les rincer avant séchage.
f) Vérifier que les cuves utilisées sont compatibles avec les constituants des
échantillons et des étalons utilisés. Les cuves plastiques ne sont pas
compatibles avec certains solvants organiques.
g) Manipuler les cuves avec soin par les surfaces supérieures non optiques.
Retirer toute trace de doigt par une procédure de nettoyage appropriée.
h) Choisir les cuves à circulation en fonction du type d'échantillon, du volume
aspiré, du système de pompage et du cycle de rinçage, ainsi que de la gestion
des rejets.
5. La sensibilité élevée des analyses fluorimétriques exige l'absence totale de
contamination dans la verrerie utilisée pour la préparation des échantillons et des
étalons.
6. Utiliser des produits chimiques et réactifs de la qualité et pureté les plus élevées
(qualité analytique) pour la préparation des échantillons et des étalons. Vérifier
l'absence de fluorescence de fond excessive aux longueurs d'onde utilisées.
7. Ne pas stocker les échantillons et les étalons à cause des effets de l'évaporation, et
de la dégradation chimique et photo-sensible. Préparer les échantillons et les étalons
uniquement lorsqu'ils sont nécessaires pour leur analyse.
8. La fluorescence est inversement proportionnelle à la température. Vérifier que tous
les échantillons et étalons sont équilibrés à la température ambiante avant de les
mesurer. En cas de doute, utiliser un support d'échantillon à température contrôlée.
9. Les échantillons réfrigérés ou froids forment des micro-bulles sur les parois de la
cuve lorsqu'ils réchauffent. Elles représentent une cause commune de dérive des
mesures. Vérifier que tous les échantillons et étalons sont équilibrés à la température
ambiante avant de les mesurer.
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