Publicité
Trajet
Distance
d'examen
(mm)
1 à 2 ; 2 à 3 ;
6,5
5 à 6 ; 6 à 7
1 à 8 ; 8 à 7 ;
11
3 à 4 ; 4 à 5
Procédure de contrôle qualité :
Les lames doivent être colorées avec des réactifs utilisés pour le diagnostic d'échantillon de patient. Le
technicien effectuant une coloration d'échantillon de patient doit effectuer la coloration de lame témoin
selon les procédures de coloration d'échantillon. Les frottis positifs et négatifs doivent être examinés par
des techniciens de laboratoire pratiquant le diagnostic d'échantillons de patient. Le contrôle qualité doit
être effectué en routine et conformément aux réglementations en vigueur. Les résultats doivent être
documentés.
1. Colorer la lame de contrôle qualité F.A.S.T. QBC avec la lame d'essai, en utilisant le kit de coloration
à l'auramine O F.A.S.T. conformément à la procédure ci-dessus.
2. Maintenir les lames séparées pendant la procédure de coloration afin d'éviter une contamination
croisée des réactifs de coloration d'une lame à une autre.
3. Examiner la lame colorée à l'aide d'un microscope approprié pour le type de coloration et enregistrer
les résultats.
Une fluorescence inadéquate du témoin QC positif peut indiquer une dégradation du réactif de coloration.
Ne pas utiliser pour des échantillons de patient jusqu'à ce que le problème soit corrigé.
Résultats attendus
En observant avec un microscope à fluorescence ayant une configuration de filtre d'excitation bleu et
d'émission vert (par exemple, filtre d'excitation : 435 – 480 nm; filtre d'émission : 510 – 600 nm), les marquages
sur la lame SureFocus doivent émettre une fluorescence verte et constituent un moyen utile pour la mise
au point. Une fois la mise au point effectuée, des mycobactéries, telles que celles contenues dans le
témoin positif, et les autres organismes acido-alcoolo-résistants émettent une fluorescence verte sur fond
sombre. Tous les autres organismes, tels que ceux contenus dans le témoin négatif, doivent présenter les
caractéristiques de coloration d'arrière-plan. Un bacille fluorescent constitue une identification provisoire
d'espèce Mycobacterium.
Les mycobactéries dans le puits positif de la lame de contrôle qualité, doivent émettre une fluorescence
vert vif. Le témoin négatif doit présenter les caractéristiques de coloration d'arrière-plan.
Si les résultats attendus ne sont pas obtenus, rechercher la cause du problème, qui peut comprendre un
défaut des réactifs, de l'instrument, et des opérateurs. Si un défaut de témoin est suspecté, utiliser un autre
moyen pour tester le système tel qu'un échantillon de patient (positif ou négatif connu). Ne pas produire
de résultats de patient tant que le défaut du système n'a pas été corrigé.
Limitations
Certaines mycobactéries à croissance rapide peuvent ne pas émettre de fluorescence avec cette coloration.
Les méthodes Ziehl-Neelsen, Kinyoun, ou d'autres doivent être utilisées sur ces échantillons. La fluorescence
de frottis s'atténue progressivement avec le temps et peut se dégrader en cas de chauffage et illumination
excessifs, par conséquent des échantillons colorés doivent être examinés dès que possible.
Si aucun signal de fluorescence n'est observé en provenance des traits sur les lames SureFocus, ne pas
utiliser les lames pour la microscopie de fluorescence.
Bien qu'un résultat positif indique la présence de mycobactéries, un résultat négatif ne permet pas d'exclure
une infection. D'autres méthodes de diagnostic telles que la culture ou la PCR doivent être utilisées pour
identification positive.
Si les lames SureFocus n'émettent pas de fluorescence ou que les lames de contrôle qualité présentent une
Champs de vision
200x
400x
600x
7
14
12
24
21
36
4
Publicité
