Table des Matières
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3. Notez le volume total de la solution afin de pouvoir estimer le
degré d'évaporation et le corriger.
4. Chauffez la suspension d'agarose dans un four à micro-ondes
pendant 60 secondes. Agitez la fiole pour vous assurer que tous
les grains collant aux parois soient intégrés dans la solution.
L'agarose non dissoute ressemble à de petites « lentilles » flottant
dans la solution. Chauffez pendant encore 30 à 60 secondes.
Examinez de nouveau la solution et répétez le processus de
chauffe jusqu'à ce que l'agarose se dissolve complètement.
5. Ajoutez de l'eau désionisée pour remplacer tout volume perdu à
cause de l'évaporation pendant le processus de chauffe.
6. Laissez la solution refroidir jusqu'à 60 °C. Placez la fiole dans une
hotte et ajoutez 5 ml de tampon 10X MAE (voir Annexe A pour la
recette), et 1,5 ml de formaldéhyde à 37 %.
ATTENTION : Les vapeurs de formaldéhyde sont toxiques. La
préparation du gel doit avoir lieu dans une hotte et les solutions et
gels contenant du formaldéhyde doivent rester couverts si possible.
Passez à la Section C, Étape 1, « Coulage du gel » à la page 12.
C. Coulage du gel
1. Placez le socle de coulage du gel sur une paillasse.
ATTENTION !
dans une hotte.
2. Insérez le plateau de coulage du gel dans le socle de coulage. Si
vous utilisez les gels 12 x 6 cm, placez l'espaceur au centre du
socle de coulage, puis insérez les deux plateaux de gel paysage
de 12 x 6 cm (voir l'orientation 2 ci-dessous).
3. Lorsque la solution de gel a refroidi à environ 55 °C, versez-la
lentement dans le plateau pour gel. Si des solutions de gel plus
chaudes sont régulièrement versées, le plateau peut se déformer
avec le temps.
Coulez les gels d'agarose contenant du formaldéhyde
Séparateur de gel
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