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Optimiser les mises en culture
Les bioréacteurs Cellbag possèdent une large plage de volumes de fonctionnement.
Cela permet une mise à l'échelle efficace et élimine les transferts séquentiels fasti-
dieux. Démarrer avec des volumes réduits et ajouter des milieux de cultures frais au
bioréacteur Cellbag au fur et à mesure que les cellules se développent. Une expansion
allant jusqu'à 1:10 est possible dans un seul sac.
Une séquence d'inoculum type est :
Étape
1
2
3
4
5
Dans cette séquence, un seul transfert a été effectué en passant de 200 ml à 10 l de
milieu de culture. Cela permet de gagner du temps et de réduire le risque de contami-
nation. Ce schéma peut également être utilisé pour augmenter l'inoculum dans des
bioréacteurs conventionnels plus grands.
Échange de milieu de culture
Pour des instructions sur la surveillance et la configuration des conditions de fonction-
nement pour la configuration actuelle du système, voir les parties concernées de
Chapitre 5 Système de commande WAVE Bioreactor, à la page
description des composants du sac de culture, voir
page
Remarque :
Étape
1
2
WAVE Bioreactor 20/50 et WAVEPOD II Mode d'emploi 29005707 AD
Action
Commencer avec 200 ml de milieu dans un Cellbag de 2 l. Ajouter l'inoculum.
Lorsque les cellules atteignent 2 × 10
de milieu au bioréacteur Cellbag.
Lorsque les cellules atteignent de nouveau 2 × 10
ajouter davantage de milieu pour que le volume atteigne 1 litre.
Lorsque ces cellules atteignent 2 × 10
dispositif de fusion dans un Cellbag de 20 l contenant 2 litres de milieu.
Lorsque les cellules dans le Cellbag de 20 l atteignent de nouveau 2 × 10
cellules/ml, compléter le volume pour obtenir 10 litres et continuer la mise
en culture avec l'intégralité du volume.
31.
Afin d'éviter toute réduction éventuelle d'oxygène, l'échange de
milieu de culture doit être réalisé en moins d'une heure.
Action
Arrêter le mouvement de bascule et l'aération et pincer les filtres d'entrée et
de sortie.
Retirer le plateau de bascule de l'instrument WAVE Bioreactor et le placer en
position verticale, reposant contre un support. Laisser les particules (y
compris les cellules et microporteurs, si nécessaire) décanter 10 à
15 minutes.
8 Fonctionnement
8.9 Options de mise en culture
6
6
à 3 × 10
cellules/ml, ajouter 300 ml
6
6
à 3 × 10
6
cellules/ml, transférer à l'aide d'un
71. Pour obtenir une
Section 3.3 Bioréacteur Cellbag, à la
cellules/ml,
6
211
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