Bibby Scientific jenway 7300 Mode D'emploi page 11

CHAPITRE 3 -
3.1 THÉORIE DE LA MESURE DE SPECTROPHOTOMETRIE
La spectrophotométrie UV-visible est la mesure de l'absorbance de la lumière à une longueur d'onde spécifique dans
un échantillon. Ceci est utilisé pour identifier la présence et la concentration d'entités moléculaires dans un
échantillon. La loi de Beer-Lambert est utilisée pour relier l'absorption de la lumière aux propriétés de l'échantillon à
travers lequel la lumière a voyagé. La loi de Berr-Lambert établit que :
A est l'absorbance
est le coefficient d'absorption moléculaire (l mol
c est la concentration (mol l
l est le trajet optique (cm)
La loi montre que l'absorbance est linéaire par rapport à la concentration mais ceci est uniquement vrai pour les
faibles concentrations. Pour des niveaux d'absorbance supérieurs à 3, la concentration commence à dévier de la
relation linéaire.
La transmission est la proportion de lumière qui passe à travers l'échantillon :
Par conséquent :
L'absorbance est inversement liée à la transmission :
Théorie et pratique des mesures de
spectrophotométrie
-1
cm
-1
)
où
L
0
l
t
l
11
-1
)
est la lumière incidente
est la lumière transmise
est le trajet optique