Méthode D'analyse Pour Confirmation; Spectromètre De Masse - Dräger DrugTest 5000 Manuel Technique

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9.2
Méthode d'analyse pour confirmation
Le principe du Dräger DrugTest 5000 repose sur la réaction
dite antigène-antocorps. Ensuite, l'anticorps allie son paratope
spécifique avec l'épitope correspondant de l'antigène. Ce lien
facilité par des liens de type « pont hydrogène », des liens
ioniques, des interactions hydrophobes et des forces van der
Waals est une réaction d'équilibre qui est donc soumise à la loi
d'action de masse. Il est possible, avec un système de
vérification suffisamment optimisé, selon l'antigène, de les
démontrer dans l'intervalle femtomol, et même de les
1)
quantifier
.
9.2.1
Pourquoi confirmer?
Une procédure de vérification immunologique à la fine pointe,
surtout pour vérifier les trousses de dépistage, est conçue pour
s'assurer qu'à compter d'une concentration donnée, un
résultat positif avec une probabilité de >90 à 95 % est
2)
effectivement positif
.
L'ambiguïté résiduelle de cet énoncé analytique et le fait que
les résultats du dépistage immunochimique sont également
affectés par l'interactivité et des interférences d'autres
substances, probablement très semblables d'un point de vue
chimique, doivent toujours être envisagés. Les résultats
positifs doivent être confirmés par une deuxième procédure
indépendante, comme la chromatographie gazeuse ou liquide,
avec spectrométrie de masse subséquente. Dans le cadre des
dépistages de masse et des programmes de dépistage, on
recommande d'effectuer un échantillonnage aléatoire défini (p.
ex., 10 à 20 %) des résultats négatifs sur place à l'aide de la
spectrographie de masse de chromatographie gazeuse ou
liquide.
9.2.2
Chromatographie
Le terme chromatographie fait référence à des méthodes
physiques alors que les substances sont séparées par
distribution entre une phase statique (stationnaire) et une
phase mobile.
9.2.3
Chromatographie gazeuse
La chromatographie gazeuse est une méthode de séparation
très efficace où un mélange dissout de substances
(l'échantillon) est déplacé à l'aide d'un courant de gaz (phase
mobile) à partir d'une phase stationnaire. Ce faisant,
l'échantillon est séparé en éléments individuels. Le gaz
transporteur inerte est habituellement de l'hélium.
La phase stationnaire consiste en une colonne de quartz d'une
longueur de 10 à 50 m, d'un diamètre interne de 0,2 mm, chargée
à l'intérieur d'une pellicule particulièrement mince de matériau
séparateur. Les éléments séparés de l'échantillon quittent la
colonne de séparation après un délai précis (temps de rétention)
et peuvent alors être analysés par un capteur sensible.
Dans le domaine de l'analyse de médicaments, un spectromètre
de masse a été branché en série avec succès à cette fin
(chromatographie gazeuse/spectrométrie de masse)
1) Polzius, R. and Manns, A., (2002) Dräger booklet 373, p. 23-28
2) Luttmann, W. et al. (2006) The experimenter, immunology,
Elsevier GmbH Munich
3) Schwedt, G. (1992): Pocket atlas of analytics, published by Georg
Thiem, Stuttgart
Système Dräger DrugTest
9.2.4
Spectromètre de masse
Le spectromètre de masse est constitué d'une source d'ions
où les molécules gazeuses sont ionisées, d'un analyseur de
masse qui sépare les ions. Selon leur rapport masse/charge
(m/z) et un détecteur qui compte le nombre d'ions produits. En
résultat de l'analyse, un spectre de masse caractéristique est
produit pour chaque substance qui démontre quels ions ont
été formés et dans quelles quantités relatives. Ceci permet
une identification de l'analyte définie.
3)
.
Annexe
57

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